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請(qǐng)看這份流式細(xì)胞儀的調(diào)試和使用規(guī)范
2020年05月28日 17:59:49 來(lái)源:化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量:5254

古語(yǔ)說(shuō):“工欲善其事,必先利其器”。要想很好地應(yīng)用流式細(xì)胞分析和分選技術(shù),必需先對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)試,使其處于良好的工作狀態(tài),并能正確使用儀器。下面簡(jiǎn)要介紹細(xì)胞計(jì)的調(diào)試項(xiàng)目及要點(diǎn)、使用的程序等等。

  【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】古語(yǔ)說(shuō):“工欲善其事,必先利其器”。要想很好地應(yīng)用流式細(xì)胞分析和分選技術(shù),必需先對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)試,使其處于良好的工作狀態(tài),并能正確使用儀器。下面簡(jiǎn)要介紹細(xì)胞計(jì)的調(diào)試項(xiàng)目及要點(diǎn)、使用的程序等等。
 
  調(diào)試和校準(zhǔn)
 
  流式細(xì)胞儀在使用前,甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試,以保證工作的可靠性和性。調(diào)試的項(xiàng)目主要是激光強(qiáng)度、液流速度和測(cè)量區(qū)的光路等。
 
  激光強(qiáng)度:除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長(zhǎng)的激光出光外,還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大。
 
  液流速度:可通過操作臺(tái)數(shù)字顯示監(jiān)督,調(diào)節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
 
  測(cè)量區(qū)光路調(diào)節(jié):這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測(cè)量區(qū)的液流、激光束、90散射測(cè)量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成。
 
  操作和使用
 
  1. 打開電源,對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱;
 
  2. 打開氣體閾,調(diào)節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
 
  3. 在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
 
  4. 利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0和90散射的熒光強(qiáng)度強(qiáng),并要求變異系數(shù)為小;
 
  5. 選定流速、測(cè)量細(xì)胞數(shù)、測(cè)量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測(cè)量樣品和對(duì)照樣品;同時(shí)選擇計(jì)算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測(cè)量進(jìn)程;
 
  6. 樣品測(cè)量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
 
  7. 因?yàn)閷?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已存入計(jì)算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測(cè)量裝置,而單獨(dú)使用計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;
 
  8. 將所需結(jié)果打印出來(lái)。
 
  操作和使用中的注意事項(xiàng)
 
  1. 光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強(qiáng)的光線下以后,需要較長(zhǎng)時(shí)間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
 
  2. 光源不得在短時(shí)間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
 
  3. 液流系統(tǒng)必需隨時(shí)保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
 
  4. 注意根據(jù)測(cè)量對(duì)象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
 
  5. 特別強(qiáng)調(diào)每次測(cè)量都需要對(duì)照組。
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