美谷分子儀器(上海)有限公司
使用雙發射熒光染料監測癌細胞系的線粒體膜電位
檢測樣品:癌細胞系
檢測項目:線粒體膜電位
方案概述:從研究疾病到評估藥物和環境化合物誘導的毒性反應,基于細胞的測定法通常聚焦于線粒體,旨在監測細胞健康。線粒體功能是整個細胞健康的關鍵指標,線粒體功能障礙與多種疾病 ( 包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥 ) 的關聯密切相關。
從研究疾病到評估藥物和環境化合物誘導的毒性反應,基于細胞的測定法通常聚焦于線粒體,旨在監測細胞健康。線粒體功能是整個細胞健康的關鍵指標,線粒體功能障礙與多種疾病 ( 包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥 ) 的關聯密切相關。 1 此外,罕見疾病的發病機制可能由編碼線粒體蛋白的基因或線粒體 DNA 中的突變驅動。 1 在整個藥物開發和測試過程中,評估線粒體功能是至關重要的。恢復線粒體功能的療法的發展和靶向癌癥線粒體功能障礙的化療藥物的發展就是例證。 3 此外,線粒體功能的評估是臨床前藥物安全性評估中至關重要的一步,因為線粒體功能障礙可能由藥物觸發,進而對細胞和組織健康產生不利影響。測量線粒體膜電位 (MMP) 以監測線粒體代謝活性的變化是一種評估線粒體功能的靈敏且有效的方法。線粒體膜電位是檢測凋亡過程中線粒體去極化,檢測多藥耐藥細胞以及評估各種毒性篩選中線粒體功能的重要工具。 1-2 MMP 的評估通常使用親脂性陽離子熒光染料進行。 根據線粒體膜電位的狀態,MITO-ID膜電位染料的熒光會發生變化。具體來說,細胞質中它以單體形成存 在,發出綠 色熒 光 (FITC, 530 nM);在活性線粒體中,它在線粒體基質中聚集而發出橙色熒光 (TRITC,570 nM)。當 MMP 被破壞時,MITO-ID 染料退出去極化線粒體,而以單體形式存在,可以觀測到橙色熒光降低到消失。
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