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高單個神經元切割

實現基因表達的可靠分析

帕金森癥是一種常見的進行性中樞神經系統退行性疾病，它與黑質中釋放多巴胺的神經元細胞死亡有關。受疾病感染的多巴胺釋放神經元與健康神經元在基因表達譜上存在差異，而這種差異有助于確定治療的靶基因。

對于基因表達分析來說，研究整體組織是徒勞無意義的，單細胞分辨率才是關鍵。如果分析多巴胺釋放神經元與所有其他腦細胞的混合物，會影響研究結果。

采用徠卡的激光顯微切割 (LMD) 方法能夠特異地從帕金森癥患者尸檢組織中分離單個多巴胺能神經元，從而進行分析，消除因檢測不均質細胞群體造成的誤判。

研究領域

•    阿爾茨海默癥

•    發育生物學

•    衰老

•    腫瘤組織的突變分析

•    其他疾病

參考文獻

•    Casli et al., Neuroscience, 2016

•    Schlaudraff et al., Neurobiology of Aging, 2014, 35 (10)

•    Bandyopadhyay et al., JoVE, 2014, 83

•    Gründemann et al., NAR, 2008, 36 (7)

•    Ramirez et al., Nature Genetics, 2006, 38

單細胞精度的基因表達分析工作流程

樣本制備

使用冷凍切片機切片，隨后將制備好的切片放在特制的 LMD 載玻片上。

固定和染色

將組織固定并染色，用于后續顯微成像和激光顯微切割。可使用染色儀實現自動化。

可視化和定義 ROI

自動生成樣本概覽。可以自動或手動輕松識別和標注感興趣區域 (ROI)。

激光顯微切割

可使用Leica LMD系統，自動切割ROI區域，并借助重力將切割下來的組織收集到 PCR管或 8 聯管等標準且經濟的實驗室耗材之中。

基因表達分析

使用傳統的 qPCR ，或者使用微陣列或下一代測序 (NGS) 等技術進行基因表達分析。

您將享受如下優勢：

無接觸式單細胞切割

徠卡提供的激光顯微切割系統是實現單細胞高精度切割的理想之選。您可以一邊觀察，一邊輕松切割單個細胞。無接觸切割有助于防止核糖核酸酶等產生的污染。

使用徠卡顯微系統提供 的LMD 系統，通過重力收集分離純化后的物質

激光顯微切割前、后的小鼠大腦冷凍切片。甲苯胺藍染色。