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研域(上海)化學試劑有限公司
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ELISA試劑盒使用方法講解

時間:2016/12/12閱讀:2093
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公司出產的ELISA試劑盒敏感性高,特異性強,重復性好。試劑盒中試劑安穩、易保留,操作簡潔,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中,檢查意圖:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。合適檢查包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、安排勻漿等標本。
ELISA試劑盒使用方法一
雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml,4℃ 。次日,棄去孔內溶液,用洗刷緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗刷,下同)。
2. 加樣:加必定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗刷。(一起做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗刷。
4. 加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 停止反響:于各反響孔中參加2M硫酸0.05ml。
6. 成果判定:可于白色布景上,直接用肉眼調查成果:反響孔內色彩越深,陽性程度越強,陰性反響為無色或極淺,依據所呈色彩的深淺,以“+"、“-"號表明。也可測OD值:在ELISA檢查儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
ELISA試劑盒使用方法二
間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
2.次日洗刷3次;
3.加必定稀釋的待檢樣品(不知道抗體)0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時,洗刷;
4.(一起做空白、陰性及陽性孔對照)于反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗刷;
6.’zui終一遍用DDW洗刷。
ELISA試劑盒其他步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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