人胚胎生殖細(xì)胞體外培養(yǎng)條件的優(yōu)化及細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)的研究目

優(yōu)化人胚胎生殖細(xì)胞（EG細(xì)胞）的體外培養(yǎng)體系，并將生長狀態(tài)良好的傳代的人EG細(xì)胞移植用于大鼠心肌梗死模型的 治療 ，探討人胚胎生殖細(xì)胞進(jìn)行異種移植對(duì)大鼠心肌梗死的治療機(jī)制。方法：取5~10周人胚胎生殖腺嵴和背側(cè)腸系膜，用添加和不添加細(xì)胞因子的兩種培養(yǎng)體系對(duì)比進(jìn)行組織塊原代及傳代培養(yǎng)，選取生長情況良好的傳至第4代的人EG細(xì)胞，移植到急性心肌梗死大鼠的梗死心肌周圍，分別于移植后1天、1、2、4周處死大鼠，以鼠抗人細(xì)胞核抗體MAB1281作為示蹤劑[1]，通過免疫組化方法檢測(cè)移植細(xì)胞的分布。結(jié)果：在培養(yǎng)液中添加LIF和b-FGF后原代及傳代培養(yǎng)的人EG細(xì)胞生長旺盛，形成集落更早，傳到第4代形成的集落體積變化不大；移植組人EG細(xì)胞在移植后1天、1周、2周、4周均可以在心梗區(qū)域觀察到MAB1281陽性細(xì)胞。結(jié)論：添加LIF和b-FGF的培養(yǎng)體系是更的人EG細(xì)胞培養(yǎng)體系。人EG細(xì)胞可異種移植，人EG細(xì)胞在大鼠心肌梗死處由心外膜層逐漸向心肌層遷移。