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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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TRIZOL法如何提取細(xì)胞中的總RNA

時(shí)間:2025/3/18閱讀:332
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RIZOL是一種總RNA抽提試劑,TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性,是最常見的RNA提取方法之一。


實(shí)驗(yàn)試劑及原理:

(1)TRIZOL含有苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。

TRIZOL的主要成分是苯酚。

TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性,因此常用于對(duì)純化RNA及標(biāo)準(zhǔn)化RNA的生產(chǎn)。

(2)氯仿:

其作為有機(jī)溶劑可以快速破壞細(xì)胞、使內(nèi)容物釋放、去除勻漿中的脂溶性雜質(zhì);

可以抑制RNA酶的活性,并使蛋白質(zhì)變性,易于通過離心去除。

(3)異丙醇:

用于增加RNA局部密度,作為RNA的沉淀劑。

75%乙醇:有機(jī)溶劑,無(wú)脫水作用且揮發(fā)性好、通過相似相溶的原理達(dá)到洗滌RNA沉淀的作用。

(4)DEPC水:

不含雜質(zhì)和RNA酶,作為RNA溶解的溶劑。


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