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丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 常量法
產品名稱:丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒
產品英文名:Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
產品貨號:BC0020 產地:北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓
產品規格:50管/48樣 產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:500
庫存狀態:現貨
關鍵字:丙二醛試劑盒
簡要介紹:
氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;后者逐漸分解為一系列復雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質氧化的水平。
MDA與硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在532nm有大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。
產品詳細描述
商品貨號: | 商品品牌: | 規格 | 基本售價: | 選擇規格 |
BC0020-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣 | 500.00元 | ![]() |
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;后者逐漸分解為一系列復雜的化合 物,其中包括 MDA。通過檢測 MDA 的水平即可檢測脂質氧化的水平。
測定原理:
MDA 與硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在 532nm有大吸收 峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定 600nm下的吸光度,利用532nm 與 600nm下的吸光度的差值計算 MDA 的含量。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾 水。
試劑的組成和配置:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 30mL×1 瓶,4℃保存;
注意事項: 臨用前注意試劑一是否*溶解,如未溶解,可以70℃加熱,并振蕩以促進溶解。
MDA 提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量 (104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL提 取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或200W,超聲 3s,間隔 10s,重復30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織, 加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
測定步驟:
1、吸取 0.6mL 試劑一于 1.5mL離心管中,再加入 0.2mL樣本, 混勻。
2、95℃水浴中保溫 30min(蓋緊,防止水分散失),置于冰浴中冷卻,10000g,25℃,離心 10min。
3、吸取上清液于 1mL玻璃比色皿中,測定 532nm和 600nm處的吸光度,記為 A532和 A600, ΔA= A532-A600。
MDA 含量計算:
MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=25.8×ΔA
2、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算
(1)按照蛋白濃度計算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外測定,建議使用本公司 BCA蛋白質含量測定試劑盒。
(2)按照樣品質量計算 MDA 含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總)=25.8×ΔA ÷W
(3 ) 按照細菌或細胞密度計算:
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.0516×ΔA
V 反總:反應體系總體積, 8×10-4 L;ε:丙二醛摩爾消光系數,155×103 L / mol /cm;d: 比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.2 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr: 樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。
丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 常量法