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Avidity BirA生物素蛋白連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)

2018-3-27  閱讀(3511)

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Avidity,LLC于1996年由Millard Cull,Larry Lansing,Ron Gill博士和Mark Seville博士創(chuàng)立,基于生物素對(duì)抗生物素蛋白或鏈霉親和素的非凡親和力開(kāi)發(fā)肽標(biāo)簽和分子生物學(xué)產(chǎn)品。在Affymax擔(dān)任研究人員的同時(shí),Millard參與了AviTag技術(shù)的發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)了其商業(yè)潛力,并獲得了Affymax的*權(quán)利。他開(kāi)始使用Avidity作為試劑公司,將AviTag技術(shù)的使用權(quán)授予其他公司,并銷售與該技術(shù)一起使用的產(chǎn)品。

帶有AviTag標(biāo)簽的人類全長(zhǎng)ORF克隆已經(jīng)被構(gòu)建在多種T7和CMV啟動(dòng)子表達(dá)系統(tǒng),可以立即購(gòu)買(mǎi)使用。AviTag標(biāo)簽蛋白可以被體內(nèi)或體外的生物素連接酶生物素化,而且抗生物素蛋白或鏈霉親和素可以專一地與生物素結(jié)合,正基于這兩個(gè)反應(yīng),AviTag?技術(shù)可以應(yīng)用于蛋白的固定,純化和顯影。 雖然Avidity是一個(gè)小公司,科學(xué)帶來(lái)的好處及其AviTag已得到認(rèn)可。目前, AviTag技術(shù)已經(jīng)在22個(gè)國(guó)家的世界制藥公司和研究人員中得到認(rèn)可。 

隨著Avidity成熟,該公司正在擴(kuò)大其科學(xué)視野,并調(diào)查使用生物發(fā)光 - 如在深海生物體中發(fā)現(xiàn) - 使其產(chǎn)品對(duì)科學(xué)界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接觸AvidTag與Prolume的高斯熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)結(jié)合使用。*款高斯AviTag產(chǎn)品于2007年11月發(fā)布。

此外,Avidity正在與幾家公司合作,通過(guò)將非常靈敏的光學(xué)傳感器與基于熒光素酶的測(cè)定相結(jié)合,開(kāi)發(fā)出新一代高度移動(dòng),簡(jiǎn)單,廉價(jià)且功能強(qiáng)大的診斷功能。結(jié)合BP蛋白質(zhì)組學(xué)(新型測(cè)定生物化學(xué)),Prolume(發(fā)光/熒光分子和硬件創(chuàng)新專家),黑森林工程(光學(xué)器件工程),Avidity正在開(kāi)發(fā)用于檢測(cè)和鑒定的蛋白質(zhì)和DNA微陣列生物芯片和生物傳感器的疾病病原體和復(fù)合高通量篩選(HTS)。

 

 

  BirA生物素蛋白連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒

貨號(hào):BirA500 

品名:BirA-500: BirA biotin-protein ligase standard reaction kit

 

產(chǎn)品信息

生物素蛋白連接酶(BirA的EC 6.3.4.15)activates形成生物素生物素和5′- adenylate轉(zhuǎn)移到生物素蛋白的生物素接受(如avitag™肽)。它也抑制功能的生物素操縱子。該基因編碼的蛋白是由BirA的基因。

 

BirA生物素 - 蛋白質(zhì)連接酶(EC 6.3.4.15)以和靶向的方式通過(guò)ATP中間體(生物素5'-腺苷酸)共價(jià)加入生物素受體肽/蛋白質(zhì)中的d生物素。酶促生物素化蛋白質(zhì)的下游應(yīng)用是多樣的,重要和有力的。*的生物素 - 抗生物素蛋白/鏈霉抗生物素蛋白相互作用通常用于親和層析或蛋白質(zhì)固定在表面或底物上。通過(guò)抗生物素抗體或抗生物素蛋白/鏈霉親和素 - 報(bào)道酶結(jié)合物(-HRP,堿性磷酸酶)或熒光探針進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)成為可能。生物素化MHC分子的多聚體形式是免疫生物學(xué)中的常用工具。

當(dāng)與我們的AviTag TM生物素受體肽氨基酸序列組合使用時(shí),生物素化發(fā)生在天然大腸桿菌BCCP底物的兩倍,比其他肽序列的生物素化多達(dá)一個(gè)數(shù)量級(jí)。因此,與其他可用序列相比,AviTagTM序列需要較少的BirA酶和較短的生物素化孵育時(shí)間才能完成。如果蛋白質(zhì)不穩(wěn)定或蛋白酶活動(dòng)是關(guān)注的,這對(duì)下游成功可能是重要的。

我們的BirA酶是由birA基因編碼的大腸桿菌野生型,并通過(guò)傳統(tǒng)方法純化至大于99%的純度。

該酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;的birA;生物素全酶合成酶;生物素 - [乙酰-CoA羧化酶]合成酶;生物素 -[乙酰輔酶A羧化酶]連接酶;生物素 -[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;乙酰CoA高脫羧酶合成酶;乙酰CoA高脫羧酶合成酶;生物素:apocar?boxylase連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

 

試劑盒組成:

兩瓶,每瓶20uL1mg/mL BirA生物素蛋白連接酶(共40ug)

兩瓶,每瓶1.5mLBiomixA(0.5M雙甘酯緩沖溶液,pH8.3)

兩瓶,每瓶1.5mLBiomixB(100mM ATP,100mM鎂(OAC)2,500uM d-生物素)

兩瓶,每瓶1.5mL額外的BIO-200(500uM d-生物素)

 

儲(chǔ)存條件:

試劑盒,干冰運(yùn)輸,-80度保存。如解凍后使用,4度保存。解凍后的酶可以在液氮中重新儲(chǔ)存,-80度儲(chǔ)存。

其他組份,biomixa,biomixb和bio-200,-20度長(zhǎng)期保存。biomixa和bio-200,在4度可短期儲(chǔ)存。Biomixb,-20度保存或者更低溫度儲(chǔ)存。

穩(wěn)定性:生物素蛋白連接酶BirA,4度存放一個(gè)月,活性保留>80。長(zhǎng)期保存-80度,每次解凍,酶活性降低10%。

實(shí)驗(yàn)步驟:

以700 µl純化好的 MHC/peptide 復(fù)合物(1-2mg)為例,加入:100 µl BiomixA,100 µl BiomixB,100 µl d-biotin,10 µl BirA enzyme (30 µg),0.5 ul pepstatin (2 mg/ml in DMSO),0.5 µl leupeptin (2 mg/ml in dH2O)室溫孵育過(guò)夜(反應(yīng)液中不要有EDTA)

 

 

 

https://www.avidity。。com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit

 

我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購(gòu),

1:基本什么都能進(jìn)口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的,

2:貨品全,現(xiàn)經(jīng)營(yíng)過(guò)700多個(gè)品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口,特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢(shì),

3:提供加急服務(wù),一般1-2周到貨,超過(guò)時(shí)限加急費(fèi)全免

4:價(jià)格公道,絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì),當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因?yàn)橐馕吨鴽](méi)有服務(wù).

5:良好的信譽(yù),大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù),客戶包括清華,北大 交大 復(fù)旦,中山等100多所大學(xué),ROCHE,阿斯利康,國(guó)藥 ,fisher等500多家公司

6:我們*代理的品牌有:Antibody Research Corporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen, Inc. ,clemente-associates,clodronaiposomes,Columbia Biosciences,enzyme research,Gene Bridges GmbH,Genovis,AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH,Haematologic Technologies HTI Haemtech,hookelabs,Immudex,Innovative Research of America,inspiralis ,List Biological Laboratories, Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-Freez Biologicals,pentapharm,progen,Protein Ark,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences,Teknova,TriLink BioTechnologies, Inc.,Zyagen Laboratories 等

7:我們還是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批發(fā),歡迎合作。

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