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Haematologic HCPC-0070說明書
HTI HCPC-0070
Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注冊(cè)公司，是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì)，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì)，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)修飾，化驗(yàn)開發(fā)，合同制造和合同研究。
Haematologic HCPC-0070說明書
蛋白質(zhì)C. Protein C
蛋白質(zhì)C
的結(jié)構(gòu)域表示蛋白質(zhì)C的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)，其中：GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域，EGF =含有與人表皮生長(zhǎng)因子同源的序列的區(qū)域，AP =在酶原轉(zhuǎn)化為釋放后釋放的活化肽。活性絲氨酸蛋白酶，催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。箭頭表示在酶原激活期間被凝血酶蛋白水解切割的位點(diǎn)。
HCPC-0070 人體蛋白C
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尺寸 | 100微克 |
公式 | 50％甘油/水（v / v） |
存儲(chǔ) | -20℃下 |
純度 | 通過SDS-PAGE> 95％ |
活動(dòng)決定 | 通過顯色測(cè)定法<0.5％aPC活性 |
保質(zhì)期（妥善保存） | 12個(gè)月 |
BCPC-1070 牛蛋白C
尺寸 | 100微克 |
公式 | 50％甘油/水（v / v） |
存儲(chǔ) | -20℃下 |
純度 | 通過SDS-PAGE> 95％ |
活動(dòng)決定 | 通過顯色測(cè)定法<0.5％aPC活性 |
保質(zhì)期（妥善保存） | 12個(gè)月 |
維生素K依賴性酶原蛋白C在肝臟中作為單鏈多肽合成，隨后通過從前體分子中去除二肽（Lys-146和Arg-147）轉(zhuǎn)化為二硫鍵連接的異二聚體（1） ，2）。在血漿中觀察到痕量的單鏈形式。負(fù)責(zé)蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結(jié)合的輕鏈含有11個(gè)γ-羧基谷氨酸（gla）殘基，1b-羥基天冬氨酸殘基和2個(gè)表皮生長(zhǎng)因子（EGF）同源結(jié)構(gòu)域。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體位于重鏈中。人蛋白C易于從重鏈的COOH末端蛋白水解切割肽（Mr = 3000），產(chǎn)生稱為β-蛋白C的改變形式。沒有觀察到α-和β-蛋白C之間的功能區(qū)別。在人蛋白C的重鏈Arg-12（牛的Arg-14）中的單個(gè)切割將酶原轉(zhuǎn)化為絲氨酸蛋白酶，活化的蛋白C.這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面之間的復(fù)合物催化。蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血?jiǎng)┑淖饔谩PC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血?jiǎng)┑淖饔谩PC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血?jiǎng)┑淖饔谩PC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。
如Haley等人所述，通過修改Walker程序（3），從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛蛋白C. （4）。使用免疫親和層析（5）和常規(guī)技術(shù)（4,9）的組合，從新鮮冷凍的檸檬酸化人血漿制備人蛋白C. 蛋白質(zhì)C以50％（體積/體積）甘油/ H2O提供，應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度，并使用基于顯色底物的測(cè)定法測(cè)量活性。
加載 | 人類蛋白質(zhì)C，每個(gè)泳道1μg |
緩沖 | MOPS |
標(biāo)準(zhǔn) | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） |
本土化 | 等離子體 | ||||||||
血漿濃度 | 4-5μg/ ml（人）（6） | ||||||||
行動(dòng)方式 | 酶原; 絲氨酸蛋白酶活化蛋白C（APC）的前體 | ||||||||
分子量 | 62,000（人類）（7） | ||||||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 4.4-4.8（人類）（8） | ||||||||
結(jié)構(gòu)體 | 兩條鏈，Mr = 41,000和21,000，二硫鍵連接，NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 23％（人類）（7） | ||||||||
翻譯后修改 | 十一個(gè)gla殘留物（牛），九個(gè)gla殘基（人），一個(gè)β-羥基天冬氨酸 |
- 1. Esmon，CT，Thromb進(jìn)展。和Hemosts。，10,25（1984）。
- Stenflo，J.，Semin。在Thromb。和Hemostas。，10,109（1984）。
- Walker，F(xiàn)J，et al。，Biochim。生物物理學(xué)。Acta，571,333（1979）。
- Haley，PE，et al。，J.Biol。Chem。，264,16303（1989）。
- Jenny，RJ，et al。，Prep。Biochem。，16,227（1986）。
- Griffen，JH，et al。，Blood，60,261（1982）。
- Kisiel，W.，et al。，Methods Enzymol。，80,320（1981）。
- Discipio，RG等，Biochemistry，18,899（1979）。
- Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
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