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Haematologic HCV-0100說明書

2018-11-3  閱讀(828)

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Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

Coagulation Factor V

凝血因子V.

 

 

通過α-凝血酶
活化因子V表示α-凝血酶對單鏈因子V(330,000)的活化。箭頭表示凝血酶切割因子V的位點,除了形成Va的重鏈(94,000)和輕鏈(74,000)外,還產生兩個活化肽(71,000和120,000)。因子Va的重鏈和輕鏈仍然存在在鈣離子存在下非共價結合。

HCV-0100 Human Factor V

Size

50 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

BCV-1100 Bovine Factor V

Size

100 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

 

 

因子V是一種大的單鏈血漿糖蛋白,它是血液凝固級聯中的必需成分(1)。在凝血過程中,通過絲氨酸蛋白酶α-凝血酶的有限蛋白水解(如上所述),將因子V的因子V轉化為活性輔因子因子,并且因子Xa的效率較低。活性輔因子由NH2-末端衍生的重鏈(Mr = 94,000)和COOH-末端衍生的輕鏈(Mr = 74,000)組成,其在鈣離子存在下保持非共價結合。因子Va用作絲氨酸蛋白酶因子Xa的輔因子。因子Va和Xa以非共價和鈣離子依賴性方式在磷脂表面上組裝,以形成凝血酶原酶復合物。凝血酶原酶復合物負責將酶原凝血酶原快速轉化為活性絲氨酸蛋白酶α-凝血酶。凝血酶原酶復合物的組裝相對于單獨的因子Xa的速率,凝血酶原轉化為凝血酶的速率提高了近300,000倍。通過活化蛋白C使因子Va失活,部分地實現了凝血酶原酶復合物的下調。

如Katzmann及其同事所述,使用免疫親和層析從新鮮冷凍的人血漿制備人因子V.(2)。使用Nesheim及其同事描述的常規色譜技術從新鮮牛血漿制備牛因子V.(3)。純化因子V以50%甘油(體積/體積)提供,應儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析測定純度,并在因子V凝固測定中測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子V,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

因子V是一種非常不穩定的蛋白質。一些降解的碎片通常在制劑中是顯著的。

 

本土化

血漿和血小板

血漿濃度

7.0μg/ ml(人)(4,5)
35μg/ ml(牛)(5)

行動方式

Procofactor; 由凝血酶激活形成活性輔因子,因子Va

分子量

330,000(3) - (根據牛因子V確定)

消光系數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 9.6(3) - (根據牛因子V確定)

 

結構體

一個亞基,2196個氨基酸(1,6) - (根據人因子V確定)

碳水化合物百分比

約25%(基于計算的人因子V的分子量)

參考

  • Mann,KG,et al。,Ann。Rev.Biochem。,57,915(1988)。
  • Katzmann,JA,et al。,Proc。國家科。科學院。科學。美國,78,162(1981)。
  • Nesheim,ME,et al。,J.Biol。Chem。,254,508(1979)。
  • Tracy,PB等,Blood,60,59(1982)。
  • Nesheim,ME等人,Methods Enzymol。,80,249(1981)。
  • Jenny,RJ,et al。,Proc。國家科。科學院。科學。美國,84,4846(1987)

出版物

  • Ofosu,F.,et al。,Biochem。J.(1992)283,893-897。(因子V激活)
  • Ainle,F.,et al。,Blood。2009 114:1658-1665(抑制因子V激活)
  • Weeterings,C.,et al。,Blood 2008 112:3227-3233(凝血酶代)
  • Yang,X。等,Biochem。J.(1990)272,399-406(因子V的激活)

 

 

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