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Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。
haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。
Coagulation Factor Va
凝血因子Va
說明了因子Va在凝血酶原
酶組裝中的參與和凝血酶原酶復合物的表達。由重(VaH)和輕(VaL)鏈組成的因子Va與帶負電荷的磷脂膜結合并有效地用作膜結合因子Xa(Xa)的受體。酶復合物用于將酶原凝血酶原(II)轉化為活性絲氨酸蛋白酶凝血酶(IIa),在蛋白水解事件中除去凝血酶原的片段1.2(F1.2)部分。
HCVA-0110 Human Factor Va
Size | 50 µg |
Formulation | 50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2 |
Storage | -20°C |
Purity | >95% by SDS-PAGE |
Activity Determination | Clotting assay |
Shelf Life (properly stored) | 6 months |
BCVA-1110 Bovine Factor Va
Size | 100 µg |
Formulation | 50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2 |
Storage | -20°C |
Purity | >95% by SDS-PAGE |
Activity Determination | Clotting assay |
Shelf Life (properly stored) | 6 months |
因子Va是絲氨酸蛋白酶因子Xa的輔因子,并且在鈣離子存在下,它們共同組裝在磷脂表面上以形成凝血酶原酶復合物(1)。凝血酶原酶復合物負責凝血酶原快速轉化為凝血酶。因子Va由α-凝血酶在有限的蛋白水解作用下衍生自促輔因子,因子V. 因子V的凝血酶裂解從分子的中心部分釋放出兩個重度糖基化的活化肽,其沒有輔因子功能。因子Va由NH2-末端衍生的重鏈(Mr = 94,000)和COOH-末端衍生的輕鏈(Mr = 74,000)組成,其在鈣離子存在下保持締合。輔因子結合磷脂(細胞膜)表面并有效地充當膜結合因子Xa的受體。凝血酶原酶復合物(因子Xa,因子Va,磷脂和鈣)的*組裝導致凝血酶原轉化率相對于單獨因子Xa觀察到的速率增加300,000倍。因子Va和因子Xa之間的相互作用由因子Va的重鏈和輕鏈介導,而凝血酶原與因子Va的結合僅由重鏈介導。
通過用凝血酶活化純化的因子V來制備因子Va,隨后通過免疫親和層析(2)純化。該過程產生不含活化肽和凝血酶的輔因子制劑。純化因子Va以50%甘油(體積/體積),5.0mM CaCl 2提供,并應儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析測定純度,并在因子Va凝固測定中測量活性。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris | |||||
加載 | 人因子Va,每泳道1μg | |||||
緩沖 | MOPS | |||||
標準 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的) | |||||
特別說明 | 因子V是一種非常不穩定的蛋白質。一些降解的碎片通常在制劑中是顯著的 | |||||
本土化 | 等離子和膜表面 | |||||
行動方式 | 凝血酶原酶復合物中因子Xa的輔因子 | |||||
分子量 | 168,000(基于亞基的組合分子量) | |||||
消光系數 |
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結構體 | 兩個亞基,Mr 94,000(重鏈)和74,000(輕鏈)(4) | |||||
碳水化合物百分比 | 約8%(基于人因子Va的計算分子量) |
參考
本土化 | 等離子和膜表面 | |||||
行動方式 | 凝血酶原酶復合物中因子Xa的輔因子 | |||||
分子量 | 168,000(基于亞基的組合分子量) | |||||
消光系數 |
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結構體 | 兩個亞基,Mr 94,000(重鏈)和74,000(輕鏈)(4) | |||||
碳水化合物百分比 | 約8%(基于人因子Va的計算分子量) |
出版物
- Monteiro,R.,et al。,Biochem。J.(2005)387,871-877。(凝血酶原激活)
- Reis,C.,et al。,Biochem。J.(2006)398,295-302(凝血酶原激活)
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