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intronbio 17141說明書
LPS Extraction Kit
intronbio 17141 | 100 rxn. |
產品信息
描述
能夠分離/純化存在于革蘭氏陰性細菌外壁中的LPS的產品
- •革蘭氏陰性菌中存在LPS分離/純化
- •苯酚 - 水型LPS萃取
- •有效去除蛋白質和核酸等污染物
- •有效且易于提取的LPS
- •提取LPS的整個過程多在60分鐘內完成
?LPS提取試劑盒是一種可以分離和純化革蘭氏陰性菌外壁中存在的LPS的產品。通常,革蘭氏陰性細菌除了在細胞包膜的外層中的磷脂和蛋白質之外還具有稱為脂多糖(LPS)的單獨結構。這些LPS在細菌生長和存活中起重要作用,并且已知其發揮許多作用,尤其是在宿主和寄生蟲之間的相互作用中。此外,LPS被理解為與免疫應答密切相關,例如當施加膿毒性休克時通過分泌內毒素引起外周血管塌陷,并且對于毒性病理生理反應也是重要的。這種LPS對每種細菌具有不同的提取模式,這允許細菌的系統發育分離。如前面提到的,細菌內毒素通常存在于革蘭氏陰性細菌細胞的外壁上。它不會在細菌的生命過程中表達,但是當細菌生長或死亡時,細胞壁被破壞并釋放到外面。天然內毒素由LPS,蛋白質和磷脂組成。它在自然狀態下非常穩定,強熱,帶負電,并具有大的分子量(超過1,000,000道爾頓)。通常,用三氯藝酸,丁醇或EDTA提取蛋白質以除去脂質相關蛋白(LAP),并使用苯酚提取磷脂。通常,當您嘗試提取LPS時,每細菌干重可獲得約1-4%的LPS。由于LPS萃取試劑盒基于苯酚水法,
應用
- 01LPS組成和結構的研究
- 02細菌的系統研究
- 03抗生素靶向研究
- 04LPS抑制藥物設計研究
- 05碳水化合物抗原免疫反應的研究
套件內容
內容 | 17141(100 Rxn) |
---|---|
裂解緩沖液 | 100毫升x 1 ea |
純化緩沖液 | 80毫升x 1 ea |
技術數據
LPS提取產率
應變 | LPS產量(μg) | 蛋白質污染* |
---|---|---|
鼠傷寒沙門氏菌 | 200~400 | <0.2μg |
腸炎沙門氏菌 | 90~250 | <0.2μg |
S. gallinarum | 150~450 | <0.2μg |
大腸桿菌(野生型) | 220~490 | <0.2μg |
大腸桿菌(O:055) | 260~510 | <0.2μg |
大腸桿菌(O:111) | 220~500 | <0.2μg |
大腸桿菌(O:1) | 180~380 | <0.2μg |
大腸桿菌(O:2) | 180~380 | <0.2μg |
使用LPS提取試劑盒從OD600的每個G( - )菌株中提取5個LPS,并使用Purpald測定法定量提取的LPS。結果,證實了上述提取效率。另一方面,使用我們的SMART™Micro BCA Assay Kit觀察蛋白質的存在,確認污染程度小于0.2μg。
通過從各種物種中提取的LPS給出條帶模式
泳道1:鼠傷寒沙門氏菌 泳道2:腸炎沙門氏菌
泳道3:大腸桿菌(O055) 泳道4:大腸桿菌(O111)
泳道5:S. gallinarium 泳道6:腸炎鏈球菌
泳道7:鼠傷寒沙門氏菌 泳道8 :大腸桿菌(野生型)
泳道9:大腸桿菌(O111) 泳道10:大腸桿菌(O2)
?作為從各種革蘭氏陰性菌提取的LPS的SDS-PAGE后的銀染色的結果,根據以多聚體形式存在的LPS的特征和多聚體的數量觀察到梯型帶圖案,觀察到圖案與眾不同。