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上海起發實驗試劑有限公司
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BellBrook 3010-10K COA
Transcreener®ADP2 FP測定
部件編號3010-10K
批號13851
試劑盒組分列表和儲存要求：
描述 | 部件編號 | 批號 | 組成 | 體積 | 儲存條件 |
ADP Alexa633示蹤劑，400 nM | 2013 | 13263I | AlexaFluor®633標記示蹤物，溶于2 mM HEPES(pH 7.5)，0.01%Brij-35 | 1 mL | -20°C |
ADP2抗體 | 2054 | 13278N | 3.2 mg/mL單克隆抗體的PBS溶液，pH 7.2，含10%甘油 | 3.6 mL | -20°C |
終止和檢測緩沖液B，10X | 2032 | 13734D | 200 mM HEPES、0.2%Brij-35、400 mM EDTA(pH 7.5) | 10 mL | -20°C |
5 mM ADP | 2055 | 13703F | 5 mM ADP去離子水溶液，pH 7.0 | 2 mL | -20°C |
5 mM ATP | 2056 | 13812B | 含5 mM ATP的去離子水溶液，pH 7.0 | 2 mL | -20°C |
注：將試劑儲存在-20 ℃下。單個試劑可耐受10次凍融循環。
1µM ATP下的抗體性能：
圖1：[ATP]和[ADP2抗體]之間的線性關系。[ATP]和[ADP2抗體之間的關系呈線性。（盡管顯示0.1µM和100µM ATP；但該關系對1,000µM ATP有效。）因此，可使用以下公式(y = mx)測定用于酶反應的ADP2抗體的量（使用0.1µM至1,000µM ATP）
+ b；其中10µL酶反應中x =[ATP](µM)，y =[ADP2 抗體](µg/mL)，10µL檢測混合物中，m（斜率）
= 1.08，b（y軸截距）= 1）。我們建議終體積為20µL。
圖2：1 MATP/ADP標準曲線。在酶反應緩沖液（50 mM HEPES(pH 7.5)、4 mM MgCl2、2 mM EGTA、0.01%Brij-35、1%DMSO、
和核苷酸），然后加入10 L含有2.1 g/mL ADP2抗體的ADP檢測混合物。將反應在Corning®低體積384孔板(#4514)中孵育1小時，然后使用產品文獻中所示的儀器設置在Tecan Safire2上讀數。
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Transcreener®HTS分析平臺是BellBrook Labs的專有技術。Transcreener®是BellBrook Labs的注冊商標。AlexaFluor®是Molecular Probes,Inc(Invitrogen)的注冊商標。
