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上海起發實驗試劑有限公司
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上海起發bioron 108725說明書
1、BIORON的一步WGA試劑盒由BIORON GmbH開發和生產，是DOP（退化寡核苷酸PCR）的改進版，具有優化的引物序列和BIORON*的SD聚合酶。這種酶結合了鏈置換能力和高達92°C的熱穩定性。由于這些特點，可以將這種酶用于兩種擴增無需額外移液或及時動手的步驟。該試劑盒包含從單細胞或低拷貝模板擴增人類基因組DNA所需的一切。每個試劑盒包含一個2.5x MM（不含酶的主混合物）；10 U/µl SD聚合酶；人類基因組DNA作為陽性對照和PCR級水。
該擴增基于多重置換反應，結合專門設計的針對人類基因組DNA優化的簡并引物。BIORON SD聚合酶能夠在合成新鏈的過程中替換先前的鏈。結合高達92°C的溫度穩定性，全基因組擴增分析中的兩個常見反應步驟不需要額外的手動時間。這將污染和處理錯誤的風險降低。
該試劑盒用于低拷貝數基因組DNA的可重復擴增，在約2小時內產生2-10µg產品。
2、在解凍和處理陽性對照品（PC、人類基因組DNA）和樣本時避免剪切力。
所需的額外材料
•PCR循環器
•適用于所用PCR循環器的低結合PCR管
•適用于PCR管的密封件或蓋子
•帶氣溶膠屏障的一次性低結合移液管頭
•可變容量單通道移液管
•安全層流箱
•符合當地要求的安全設備
3.一步WGA套件的申請
•單細胞DNA分析
•下一代測序（NGS）
•SNP基因分型
•基于qPCR和PCR的突變檢測
•STR和RFLP分析
•陣列技術（比較基因組雜交）
4.儲存條件和穩定性
試劑盒必須在-20°C下儲存，并在有效期前保持穩定。
使用前將2.5x MM（主混合料）、陽性對照品和水解凍。將其保持在4°C，將SD聚合酶保持在-20°C，直到需要，并在冷卻架中運輸。
請避免2.5x MM反應緩沖液的額外凍融循環。如果需要少量反應，2.5x MM的等分就足夠了。只有在遵守存儲條件的情況下，本手冊中規定的套件*性能保證才有效。
5.質量控制
BIORON一步WGA試劑盒的性能在批次間進行常規監測。
6.反應設置協議
開始前的重要注意事項：
該試劑盒用于擴增已經分離的人類基因組DNA。沒有包括提取系統。
樣本要求：
•來自1-100個細胞的基因組DNA（例如來自人類細胞的10-1000 pg DNA）
•分類染色體
•來自動物、植物或細菌的完整或片段化單鏈或雙鏈DNA
來源
•最大樣品體積14µl
•細胞染色產生的DNA可能會對試劑盒性能產生負面影響
•必須避免福爾馬林固定樣本中的DNA，以獲得最佳結果
