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Targeting Systems—轉染、熒光示蹤
Targeting Systems公司是一家依靠美國國立衛生研究院(NIH)的小型商業創新研究基金資助,于1996年5月成立的高科技生物制品企業。在成立的*年即推出其*產品線—Targefect。Targeting Systems公司從成立zui初的一個員工目前已發展為擁有多樣化的和強大的知識產權的生物企業,產品超過100種。憑借其在生物熒光研究領域的優勢,Targeting Systems公司致力于新藥研發、藥物篩選、基因表達及干細胞研究與治療的技術與產品供應。同時,Targeting Systems公司也在功能基因組學上*優勢,包括基因表達調控,通過胞內注入功能性活性蛋白從而改變細胞功能狀態,以及超敏感的報告基因檢測的研發。目前公司的主打產品是熒光素酶(Luciferases)檢測試劑盒,可以廣泛應用于藥物篩選、基因表達和干細胞研究。
Targeting Systems公司的產品的主要應用:
一、新藥研發與藥物篩選
熒光素酶是Targeting Systems公司的主打產品,該系列產品擁有zui強的熒光強度(紅色、藍色和綠色),產品有著非常寬的光譜選擇,是目前市場上擁有zui大選擇余地的超敏熒光素酶供應商,共有7種顏色的光譜,比市場上常規的Photinus和Renilla熒光素酶的熒光強6 - 1000倍。產品包括Gaussia熒光素酶,Cypridina熒光素酶,綠/藍分泌型Renilla熒光素酶,紅色Luciola Italica熒光素酶以及ans熒光素酶檢測試劑。可一次性應用單/雙或3個熒光素酶進行研究。
二、基因轉染—Targefect產品線
Targeting Systems公司*的Virofect轉染技術(一種腺病毒來源的強化配方,可直接將目的基因導入細胞核,zui大程度增強難轉染細胞的轉染效率)可實現轉染以及難轉染細胞的轉染,包括多種原代培養細胞,轉染效果甚至優于電轉染。還提供根據特定細胞設計的轉染試劑及轉染實驗方案,以提高特定難轉染細胞的轉染效率。多種因素促成了Targefect產品線的轉染與*優勢,包括Tarefect F-2 試劑,多肽增強子,Virofect轉染技術等。這些*優勢包括
1、使用*配方的試劑完成基因直接入核核;
2、使用簡單而易于操作的脂質配方完成部分難轉染細胞的基因轉染;
3、使用基于腺病毒的增強試劑配方,利用細胞表面的腺病毒受體進行基因轉染,這種方法可得到的基因轉染以及增加所轉基因的表達效率;
4、產品包括適用于大多數細胞株的細胞特異的轉染試劑與方案。
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Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) |
| HEK-293 cells |
| Human hepatocytes |
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Even Large DNA loads Vascularare efficiently delivered. Delivery of 170kD BACs in CV-1 cells |
| Smooth muscle cells |
| Macrophages (Raw 267.4 cells) |
三、腫瘤成像與細胞示蹤
Targeting Systems公司利用慢病毒-熒光素酶結合技術 (LentiGlo TM)可表達zui強的熒光,實現穩定轉染(幾乎100%的轉染效率),是體內生物成像(培養細胞或活體動物)的理想產品。LentiPower™試劑盒可在研究人員實驗室快速得包裝自己的熒光表達慢病毒。Targeting Systems公司的腫瘤成像與細胞示蹤產品還具有以下優勢:
快速制備穩定轉染的細胞;
憑借特定的分泌型熒光素酶及強熒光蛋白可在體外培養細胞或體內研究基因表達;
具有zui高的轉染效率,可穩定轉染多數難轉染細胞,如干細胞和神經細胞;
利用多種顏色(光譜)的熒光素酶及報告子可在同一組細胞中分析多個分子通路;
可在研究人員自己的啟動子或目的時間點研究基因表達;
使用安全的自失活載體,可在研究干細胞或體內腫瘤生長和存活時不損傷細胞。
四、基因沉默(konckdown)
利用Targeting Systems公司的Targefect siRNA試劑盒可轉入 siRNA /microRNA ,憑借基于Gaussia熒光素酶的pSiiScreen系統,可在體內或體外篩選。是實時高通量篩選siRNAs的理想工具。
五、干細胞研究
胚胎干細胞及間充質干細胞的轉染試劑,利用蛋白輸送系統可定向干細胞分化類型,而LentiGlo可檢測細胞的生長和存活狀態。
轉染試劑:可將功能性活性蛋白導入各種原代人類干細胞的胞內或核內,通過導入特定的轉錄因子監測體內干細胞的分化狀態。
StemTrack™:用于體內外無損傷監測干細胞存活、生長于分化。
Profect蛋白輸送試劑(Protein delivery Reagents):
LentiGlo™:是Targeting Systems公司提供的*慢病毒-熒光素酶產品,可穩定轉染人類干細胞,使之成為與熒光蛋白一起高共表達特定熒光素酶的細胞類型。
六、蛋白導入系統
Targeting Systems公司的蛋白導入系統可實現胞內或核內導入功能性蛋白、多肽或抗體,可將蛋白導入巨噬細胞,進而研究微生物導致的疾病的發病機理。具有如下優勢優勢:
可為包括人類干細胞在內的大多數細胞株導入多種蛋白;
導入蛋白具有高活性;
可導入功能性抗體;
可導入功能性酶(如CRE重組酶、caspase,β-半乳糖苷酶,熒光素酶等)進行多方面的細胞學研究;
可將功能性蛋白導入分化的細胞;
可用于鑒定微生物(細菌或寄生蟲)發病機理的毒性因素,病理機制及鑒定特定的藥物靶點;
可實現多個蛋白的同時共導入,導入效率高,可實現難轉染細胞的蛋白導入。
七、LiveResponse™
該產品是Targeting Systems公司的產品,可使用5種分泌型的強熒光報告子—Gaussia熒光素酶(482 nm), Cypridina熒光素酶(463 nm), Blue-shifted Renilla熒光素酶(467 nm), Green Renilla熒光素酶(527 nm)及Red Italica firefly熒光素酶(613 nm)—在同一群細胞分析4種不同啟動子活性,在活性中檢測 NFKB 、CRE構件、 GPVR譜及凋亡。該產品還具有以下優勢:
高的靈敏度及快速檢測功能
在同一群細胞中可分析3條或更多哦分子通路,而且不損傷細胞的前提下進行實時研究。
通過選擇不同發射波長的熒光素酶,可以實現一次熒光素酶試劑導入中研究多個熒光素酶報告子。
高熒光強度及穩定性使這些新穎的熒光素酶報告子非常適合于高通量篩選應用
與其他商業熒光素酶檢測系統相比具有高性價比
體內無損傷應用。
八、蛋白表達系統
Targefect-293/Targefect-293F是Targeting Systems公司高水平的蛋白表達體系,其*的脂質體轉染配方可實現293細胞和CHO細胞的轉染,操作方法簡便。