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上海源葉生物科技有限公司
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炭疽流式細胞分析技術
2011-6-8 閱讀(1085)
流式細胞術（flow cytometry，FCM）是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：
①測量速度快，zui快可在1s內計測數萬個細胞；
②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理特性、化學特性的多參數測量，并具有明顯的統計學意義；
③是一門綜合性的高科技方法，它綜合了激光技術、計算機技術、流體力學、細胞化學、圖像技術等眾多領域的知識和成果；
④既是細胞分析技術，又是的分選技術。FCM的數據顯示方式包括單參數直方圖（his-togram）、二維點圖（dot-plot）、二維等高圖（con-tour）、假三維圖（pseudo 3D）和列表模式1istmode）等。流式細胞儀分析技術是一種重要的免疫學技術平臺，可以實現快速敏感地檢測微生物。與傳統免疫熒光和ELISA檢測技術相比，它可以將散射信號（scatter signal）和熒光強度結合起來分析zui終結果，Stopa等用純芽孢試驗表明，與近緣菌株交Y-N．應的散射信號和熒光強度與同種反應的不同，這就增加了流式細胞儀分析技術的選擇性和特異性，降低了假陽性率，這一結論有待檢測現場標本驗證。用流式細胞分析技術的另一優點就是可以進一步限制熒光強度在結果評價中的作用，我們可以限定一個區域內必須出現熒光才能判斷為陽性，而不是單憑強度漂移來判定。但是，必須注意的是，當標本中含有大量待測細菌時（>107CFU／m1）會出現前帶現象降低熒光強度。
用流式細胞儀分析細菌或芽孢前首先應確定待檢對象是否有自發熒光，研究表明，Sterne株有白發熒光，而Ames株和Vollum株則沒有自發熒光。還要測定熒光抗體結合物有無自發熒光。然后，就可以確定結合物對不同株的反應性略有差異。一般流式細胞分析技術能檢測103個／m1以上的細菌或芽孢。所用時間不等。Stopa等發展了一種僅用5min檢測炭疽芽孢桿菌芽孢的流式細胞分析技術，并且能區分芽孢的死活。Dang等研究了芽孢滅活方法對流式細胞儀檢測的影響。結果表明，無論是用多抗，還是用單抗，檢測的熒光都發生了漂移，但是單抗檢測信號明顯降低，相反，多抗檢測信號大大增加。
