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微量法中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書

時間:2021/1/18閱讀:1551
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規格:100 管/96 樣

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書

微量法

測定意義

*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態磷及有機態磷, 土壤中*磷是限制植物生長主要因子之一。

測定原理

用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態磷,用鉬銻抗比色法測定。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液:液體 105mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加 0.5mL 蒸餾水溶解。試劑二:液體 1mL×1 支,4℃保存。

工作液:臨用前將試劑一和試劑充分混勻,加 48.5mL 蒸餾水混勻。

樣本處理

新鮮土樣風干,過20目篩,按照土壤質量(g):提取液體積(mL)為1:20的比例(建議稱取約0.05g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測。

測定操作表

 

空白管

測定管

樣本(μL)

 

20

提取液(μL)

60

40

工作液(μL)

80

80

H2O(μL)

60

60

充分混勻,25℃靜置 30min

于微量石英比色皿/96 孔板中,蒸餾水調零,測定 700nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白管和

A 測定管,△A=A 測定管-A 空白管

計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下標準曲線y=0.237x-0.2018,R2=0.9992

*磷含量(mg/kg)=(△A+0.2018)÷ 0.237×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 42.19×(△A+0.2018)÷W

V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質量,g

 

 

b.  96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.1185x-0.2018,R2=0.9992

*磷含量(mg/kg)=(△A+0.2018)÷ 0.1185×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 84.38×(△A+0.2018)÷W

V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質量,g

 

 

實驗代做服務:

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

HE染色

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Western Blot

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