ESI BIO的使命是成為客戶信賴的合作伙伴，將科學發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為診所。我們通過提供突破性的干細胞技術(shù)作為研究級和治療級產(chǎn)品來實現(xiàn)這一目標，從研究到診所的照明，以幫助我們的客戶實現(xiàn)他們治療疾病的目標。

ESI BIO建立在豐富的創(chuàng)新和科學的基礎之上。我們于2000年在新加坡成立了ES Cell International，在那里我們通過制造個可翻譯的臨床級胚胎干細胞系來創(chuàng)建歷史，以便分發(fā)給研究界。

ESI BIO現(xiàn)在開展業(yè)務Alameda CA. 我們是BioTime，Inc。擁有的以干細胞為基礎的子公司的驕傲家族的成員，我們從中受益于的科學，知識產(chǎn)權(quán)和干細胞技術(shù)的深層來源。

抗體

胚胎干細胞（ESCs）和誘導多能干細胞（iPSCs）的表征是干細胞研究中的關(guān)鍵步驟。驗證起始細胞群的常規(guī)過程應該簡單，快速，重要的是可靠，以確保準確和一致的結(jié)果。ESI BIO為您提供關(guān)鍵抗體形式和活體染色工具，這些工具專為干細胞直接開發(fā)和測試而開發(fā)。

快速而可靠的多能性驗證
ESI BIO的BioLite™抗體可直接染色培養(yǎng)液中的活細胞，因此無需犧牲可用于下游實驗的有價值物質(zhì)。

· 確認多能性標志物表達

· 允許在染色后繼續(xù)細胞培養(yǎng)

· 低內(nèi)毒素，不含Sodium azide的配方

· 無需固定或透化，僅需孵育30分鐘

圖1. [A]小鼠ES細胞的IF分析。用BioLite SSEA-1（Dy-Light 488）抗體染色后培養(yǎng)細胞和相同視野的相差圖。[B] IF重組成人成纖維細胞第11天的原代iPS細胞集落的IF分析。用BioLite TRA-1-81（DyLight 488）抗體染色后培養(yǎng)細胞和相同視野的相差圖。以10X放大率拍攝圖像。

活細胞的免疫熒光染色方案  見附件

活細胞免疫熒光染色

描述

本協(xié)議描述了用BiLite™抗體直接免疫熒光(IF)染色活細胞的方法。所有的步驟都應該在無菌的工作環(huán)境中進行。 g新鮮培養(yǎng)基。請注意：

次使用一種抗體時，建議對抗體進行滴定，以達到特定于細胞類型的*性能。

·細胞可以在多孔板中直接生長、處理和染色。·只需在生物安全柜中打開抗體，以防止可能的污染。

·保護熒光共軛物不受光線照射。所需材料

所需設備

-BioLiteTM抗體(CAT)。否ST11006或貓。否ST11008)

37°C和5% CO2培養(yǎng)箱

細胞培養(yǎng)基

熒光顯微鏡

·多能干細胞

實驗協(xié)議

參考技術(shù)數(shù)據(jù)表中推薦的起始濃度，并滴定一次抗體，以獲得*的細胞類型性能。

原抗體在新鮮細胞培養(yǎng)基中稀釋至確定的*濃度

將培養(yǎng)液從細胞孔中吸出染色，直接將稀釋后的抗體加入活細胞的培養(yǎng)井中。

在37℃下用5%CO2孵化器孵育30分鐘。

吸出一次抗體，用新鮮培養(yǎng)基輕輕沖洗兩次。

向井內(nèi)加入新鮮細胞培養(yǎng)基。

用熒光顯微鏡和適當?shù)臑V鏡檢查細胞。

8.將細胞返回孵化器并繼續(xù)正常培養(yǎng)。

BioLite™ SSEA-1 (DyLight 488) anti-Human/Mouse Antibody, 100 µL 

通過免疫熒光染色檢測活的，未固定的多能干細胞群中的SSEA-1表達。

ST11006

BioLite™表面標記允許對活的，未固定的多能干細胞群進行直接免疫熒光染色?？贵w經(jīng)過細致的應用測試和驗證，以確保它們是無菌的，無毒的，不含Sodium azide，并且不含培養(yǎng)病原體。與未處理的細胞相比，用BioLite抗體染色的菌落能夠在培養(yǎng)中繼續(xù)，對增殖和分化潛能沒有不利影響。

背景技術(shù)階段特異性胚胎抗原-1（SSEA-1）是在早期小鼠胚胎，鼠胚胎癌（EC），鼠胚胎干（ES）和鼠和人胚（EG）細胞表面上表達的碳水化合物表位。未分化的人EC和ES細胞沒有明顯的免疫反應性。人EC的分化導致SSEA-1表達的增加，而小鼠的表達減少。SSEA-1與細胞粘附，遷移和分化有關(guān)。

濃度 0.5毫克/毫升

物種反應性 人類，老鼠

主辦 小鼠單克隆

克隆 MC-480

同型 IgM，κ

免疫原 F9四角癌干細胞（X射線照射）

公式 0.2μm過濾滅菌的磷酸鹽緩沖溶液，pH 7.2，不含防腐劑。通過LAL測試確定，內(nèi)毒素水平<0.1EU /μg蛋白質(zhì)（<0.01ng /μg蛋白質(zhì)）。配方不含細菌，真菌和支原體。

儲存和穩(wěn)定性 儲存在2-8°C避光。根據(jù)指示存放，自收到之日起6個月內(nèi)穩(wěn)定。

BioLite格式不含防腐劑，因此必須在無菌條件下處理。

應用程序測試 對活的，未固定的小鼠ES細胞進行免疫熒光（IF）

推薦的稀釋液 免疫熒光1：100

流式細胞儀1：100

建議針對每種應用滴定抗體以獲得*性能。

替代名稱 CD15，階段特異性胚胎抗原1

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