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514次kamiya KT-354說明書
大鼠微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗
微量白蛋白的定量測定
在大鼠生物樣品中
貨號:KT-354
Rat Microalbumin ELISA
微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗大鼠
貨號KT-354
預期用途
大鼠微量白蛋白酶聯免疫吸附試驗(ELISA)是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫分析方法,用于大鼠生物樣品中微量白蛋白的定量測定。僅供研究使用。
引言
白蛋白是一種多功能蛋白,通過血流動力學、轉運和營養機制促進體內平衡。在所有哺乳動物和許多低等脊椎動物的血管內和血管外都發現了白蛋白。它是由肝臟合成的約67000道爾頓的分子。通常只有極少量的白蛋白逃過腎小球的再吸收,并被排泄到尿液中。許多隱匿性疾病可導致腎臟損害,這可能導致過量的血清蛋白,包括白蛋白,被腎臟和尿排出。
該ELISA可用于測定血清、組織提取物和其他生物流體中的白蛋白。
原則
雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗的原理如圖1所示。在本試驗中,樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗體反應。清洗去除未結合蛋白后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗-Album抗體。這種HRP結合抗體與先前結合的白蛋白形成復合物。在另一洗滌步驟之后,通過添加顯色底物3,3',5,5’-四甲基聯苯胺(TMB)來分析與免疫吸附劑結合的酶。結合酶的數量與被測樣品中白蛋白的濃度直接相關;因此,在450 nm處的吸收是對被測樣品中白蛋白濃度的測量。這個
從校準器建立的校準曲線中插入試樣中的白蛋白量,并對樣品稀釋進行校正。
圖1.
1.固相結合抗白蛋白抗體
2.添加校準器和樣品
3.形成白蛋白*抗白蛋白復合物
4.去除未結合的樣本蛋白質
5.添加抗alb-hrp共軛物
5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的復合物
6.去除未結合的抗ALB HRP
7.添加TMB基板
8.測定結合酶活性
組件
1。稀釋濃縮液
一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋劑的緩沖液。
2。濃縮洗滌液
一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。
三。酶抗體結合濃縮物
一小瓶含有150微升100倍濃縮親和力純化的抗大鼠白蛋白抗體,該抗體與HRP在A中結合。
穩定緩沖器。
4。TMB基質溶液
一瓶含有12毫升TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液,pH3.3。
5。停止解決方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告:避免接觸皮膚。
6。微量滴定板
12個可拆卸的8個井條,位于井架框架內。用親和力純化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校準器
一瓶含有凍干大鼠微量白蛋白校準器。
8。陽性對照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。濃度見控制證書。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀釋液的精密移液管(2μl至200μl)
•試管
•微孔板清洗機/吸氣機
•蒸餾水或去離子水
•微型板閱讀器
•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
•計時器
注意事項
1。開始分析前仔細閱讀說明。
2。此套件僅供研究使用。
三。為保證本產品的質量和可靠性,我們付出了很大的努力。但是,有可能
在這種情況下,由于干擾因素的高水平,可能會得到不尋常的結果。
4。防腐劑
陽性對照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
6。濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞抑制酶反應。
7。其他注意事項:
不要交換不同批次的套件組件。
請勿在到期日后使用套件組件。
防止試劑受到陽光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用試劑的地方吃、喝、吸煙或使用化妝品。
使用手套避免接觸試劑。
停止溶液含有稀硫酸。可能刺激眼睛和皮膚。之后用水沖洗
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