QUANTI-Blue™ 溶液是一種比色酶測定法，用于測定生物樣品（例如細胞培養(yǎng)上清液）中的任何堿性磷酸酶 (AP) 活性。它已優(yōu)化用于 96 孔板（標準程序）和 1536 孔板（高通量篩選程序）。 

QUANTI-Blue™ 解決方案可用于檢測和量化 AP 或 SEAP 活性。分泌型胚胎堿性磷酸酶(SEAP)，胎盤AP的截短形式，是廣泛使用的報告基因。SEAP 被分泌到細胞培養(yǎng)上清液中，因此提供了許多優(yōu)于細胞內(nèi)報告基因的優(yōu)勢。InvivoGen 提供了大量帶有 SEAP 報告基因的報告細胞系。

QUANTI-Blue™ 解決方案的特點和優(yōu)勢：

• 一種檢測和量化 SEAP 和 AP 活動的方便、簡單和快速的方法

• 手動操作時間短：< 10 分鐘

• 易于制備：只需將 QB 試劑和 QB 緩沖液與水混合

• 高度敏感

• 寬動態(tài)范圍

• 高飽和閾值

• 允許進行高通量篩選 (HTS)

在存在 AP 或 SEAP 的情況下，QUANTI-Blue™ 的顏色會從粉紅色變?yōu)樽仙?藍色。紫色/藍色強度反映了 AP 的活性。AP 的水平可以用肉眼定性測定或使用分光光度計在 620-655 nm 處定量測定。

圖

QUANTI-Blue™ 標準程序QUANTI-Blue™ 高通量篩選 (HTS) 程序

規(guī)格

物理化學特性：pH 值和溶解度

功能表征：使用表達 SEAP 的報告細胞的堿性磷酸酶進行細胞測定。

內(nèi)容

QUANTI-Blue™ 解決方案提供三種包裝尺寸：

• rep-qbs：5 x 1 ml QB 試劑 + 5 x 1 ml QB 緩沖液，足以為 25 x 96 孔板或 20 x 1536 孔板制備 QUANTI?Blue™ 溶液

• rep-qbs2：  10 x 1 ml QB 試劑 + 10 x 1 ml QB 緩沖液，足以為 50 x 96 孔板或 40 x 1536 孔板制備 QUANTI?Blue™ 溶液

• rep-qbs3：  1 x 20 ml QB 試劑 + 1 x 20 ml QB 緩沖液，足以為 100 x 96 孔板或 80 x 1536 孔板制備 QUANTI?Blue™ 溶液

 將 QB 試劑和 QB 緩沖液儲存在 -20°C。

重新配制的 QUANTI-Blue™ 溶液在 2-8°C 下可穩(wěn)定 2 周，在 -20°C 下可穩(wěn)定 2 個月。使重新配制的 QUANTI-Blue™ 遠離光線。

細節(jié)

QUANTI-Blue™ 標準程序

1. 按照數(shù)據(jù)表上的說明準備 QUANTI-Blue™ 溶液。在 96 孔板的每孔中分配 180 μl QUANTI-Blue™ 溶液。

2. 將 20 μl 來自表達 SEAP 的細胞的培養(yǎng)上清液添加到每個孔中。

3. 在 37°C 下孵育 15 分鐘至 6 小時后，使用酶標儀測量 620-655 nm 處的光密度 (OD)