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培養基應正確使用高壓濕熱滅菌器
2012-5-1 閱讀(4547)
培養基的滅菌應根據供應商提供的參數或用戶自己的驗證。買來的制備好的培養基應提供其使用的滅菌方法的文件。理想的供應商應提供培養基的滅菌保證水平(SAL),此水平是依靠*的生物指示劑確定的。濕熱高壓滅菌器(高壓蒸汽滅菌器)是的滅菌技術,除了一些為避免培養基中的熱敏物質遭到破壞而采用的煮沸方法。通過過濾滅菌對有些配方也是合適的。
培養基的滅菌方法、滅菌條件的效果應通過培養基的滅菌和促生長試驗來驗證。另外,如果通過濕熱滅菌,滅菌周期應經過驗證,對選擇合適的負載和體積來確保合適的熱分布。通常供應商建議采用一個已校正過的高壓滅菌鍋,在121°滅菌15分鐘。通常指培養基達到溫度的時間。當高壓滅菌鍋負載結構影響加熱的速度是時,越多的負載就需要越長的滅菌周期。然而,滅菌的時間取決于培養基的體積和高壓鍋的負載。滅菌周期中,當溫度是慢慢上升時,可能導致培養基的過度加熱。因此,必須仔細確認能達到zui小的SAL要求的滅菌周期,在過度加熱時,抑制培養基降解的趨勢。在流體循環完成后,不主張放冷后的培養基中放在高壓滅菌鍋中貯存,因為這樣可能破壞培養基。不合適的加熱或滅菌(對買來的培養基或是內部制備的培養基)可能導致顏色的不同變化,不透明,改變培養基的規格,或是PH發生漂移(與供應商的提議范圍)。
通過無菌技術為測試制備的每一批培養基其PH在放冷至室溫(25°)后,都應測定。一個扁平的pH計用于培養基表面pH值的測定,浸入式的pH計用于液體的測定。各供應商提供的培養基的pH應該在規定的±0.2的范圍內,除非通過驗證得到更寬的范圍。