詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 1號染色體開放閱讀框125抗體 |
英文名稱 | C1orf125 |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
尿嘧標準品 規格:15mg 英文名稱:
萬乃韋相關物質C標準品 規格:10mg 英文名稱:
萬乃韋相關物質D標準品 規格:15mg 英文名稱:
D纈更昔韋標準品 規格:10mg 英文名稱:
柔比星分離度用混合物標準品 規格:25mg 英文名稱:Valrubicin Resolution Mixture
纈沙坦相關物質B標準品 規格:10mg 英文名稱:
萬古B標準品(含單二萬古) 規格:350mg 英文名稱:
鴨嘴花 規格:ea 英文名稱:
維庫銨相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:
維庫銨相關物質F標準品 規格:15mg 英文名稱:
司班20 進口、國產 Span20 含量:BS
司班40 進口、國產 Span40 含量:BR
司班60 進口、國產 Span60 含量:BS,85%
司班80 進口、國產 Span80 含量:AR,85%
司班85 進口、國產 Span85 含量:AR,87%
絲脂 進口、國產 phosphatidylserine 含量:BR,20%
四基硼 進口、國產 NaTBP 含量:CP,95%
四硼 進口、國產 Potassiumtetraphenylborate 含量:AR,98%
四銨 進口、國產 Tetrapropylammoniumbromide 含量:BR,98%
四醋鉛 進口、國產 Lead(IV)acetate 含量:CP,98.5%
1號染色體開放閱讀框125抗體200mg膠含量檢測試劑盒 微量法26873-85-83493-12-796T卵泡抑素(FS)HPLC≥98%抗SSB/La抗體試劑盒20mg7681-93-8化學試劑Surfeit 3蛋白(SURF3)30mg葡萄糖化酶(GOD)測試盒 分光光度法477-32-796T卵泡抑素(FS)HPLC≥98%抗SS-A/Ro抗體試劑盒20mgEotaxin-3;CCL26723-46-6化學試劑Surfeit 4蛋白(SURF4)
30mg葡萄糖化酶(GOD)測試盒 分光光度法477-32-796T卵泡抑素(FS)HPLC≥98%抗SS-A/Ro抗體試劑盒20mgEotaxin-3;CCL26723-46-6化學試劑Surfeit 4蛋白(SURF4)300mg葡萄糖化酶(GOD)測試盒 微量法55954-61-596T卵泡抑素(FS)HPLC≥98%抗SSA/Ro抗體 試劑盒20mgEotaxin;CCL11723-46-6化學試劑Surfeit 6蛋白(SURF6)
300mg葡萄糖化酶(GOD)測試盒 微量法55954-61-596T卵泡抑素(FS)HPLC≥98%抗SSA/Ro抗體 試劑盒20mgEotaxin;CCL11723-46-6化學試劑Surfeit 6蛋白(SURF6)50mg纖維素酶(CL)測試盒 可見分光光度法478-28-496T補體3a(C3a)HPLC≥98%抗sp100抗體檢測試劑盒20mgEotaxin723-46-6化學試劑突觸回蛋白4(SYNGR4)
50mg纖維素酶(CL)測試盒 可見分光光度法478-28-496T補體3a(C3a)HPLC≥98%抗sp100抗體檢測試劑盒20mgEotaxin723-46-6化學試劑突觸回蛋白4(SYNGR4)500mg纖維素酶(CL)測試盒 微量法102115-79-796T補體3a(C3a)HPLC≥97%抗Smith抗體檢測試劑盒20mgECP25316-40-9化學試劑突觸回蛋白2(SYNGR2)
500mg纖維素酶(CL)測試盒 微量法102115-79-796T補體3a(C3a)HPLC≥97%抗Smith抗體檢測試劑盒20mgECP25316-40-9化學試劑突觸回蛋白2(SYNGR2)200mg羥脯檢測試劑盒 分光光度法7647-17-8608-66-296T補體3a(C3a)HPLC≥98%抗Scl-70抗體試劑盒20mgHA1264-62-6化學試劑突觸回蛋白3(SYNGR3)