詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 11號染色體開放閱讀框57抗體 |
英文名稱 | C11orf57 |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
二十四(標準品) 進口/國產 規格:分析標準品,≥99.5%(GC)純度:99%
三(標準品) 進口/國產 規格:分析標準品,≥99.8%(GC)純度:≥98%
二十三(標準品) 進口/國產 規格:分析標準品,≥99.5% (GC)純度:≥98%
十一(標準品) 進口/國產 規格:分析標準品,≥99.8%(GC)純度:≥98%
十一(標準品) 進口/國產 規格:分析標準品,>99.5%(GC)純度:98%
己二(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥98%
乙酰(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥98%
茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥99%(GC)純度:≥98%
癸二二辛(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)純度:≥98%
1,4丁二(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 進口/國產 規格:standard for GC,≥99%(GC)純度:≥98%
1,2,4丁三(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥99%
癸(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC ,≥99.5%(GC)純度:≥98%
月桂(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥98.0%
棕櫚(Standard for GC,≥98.0%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥98.0%(GC)純度:≥98%
水楊(standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口/國產 規格:standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥97%
油(Standard for GC,≥99%(GC)) 進口/國產 規格:Standard for GC,≥99%(GC)純度:≥97%
SSX5 滑膜肉瘤X斷點蛋白5一抗 * 0.2ml Rubitecan
STEAP4/TNFAIP9 腫瘤壞死因子α誘導蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4一抗 * 0.2ml Polyethylenepolypropylene glycol
STK31 絲氨/蘇氨蛋白激酶31一抗 * 0.2ml Catharanthine hemitartrate
UTP14A/SDCCAG16 結腸癌抗原16一抗 * 0.2ml Catharanthine sulfate
XAGE2 腫瘤/抗原12家族2一抗 * 0.2ml Catharanthine sulfate
ITIH1 衍生透明質相關蛋白一抗 * 0.2ml Combretastatin A4
GBP5/Guanylate binding protein 5 鳥嘌呤核苷結合蛋白5一抗 * 0.2ml Oxytetracycline
IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88 干擾素α17一抗 * 0.2ml Oxytetracycline
11號染色體開放閱讀框57抗體紫紅曲Penicillin G 青霉素G抗體100 ul
靈芝(赤芝,紅靈芝)8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體100 ug
乳明串珠菌RYBP/APAP1/CD337 凋亡相關蛋白1抗體100 ug
乳酸類芽孢桿菌Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5抗體100 ug
赭色擲孢酵母ADORA1 腺苷A1A受體抗體100 ug
刺囊毛霉AMP deaminase 1 腺苷單磷酸脫氨酶1抗體100 ul
休哈塔假絲酵母休哈塔亞種A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體100 ug
棘孢木霉AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗體1Kit
長枝木霉AAK1 AP2關聯激酶1抗體100 ug
赤散囊菌Cyp2-j3 細胞色素P450Ⅱj3抗體100 ug
赭曲霉OST-beta 有機溶質轉運蛋白OSTβ抗體1 Kit
棒束青霉AANAT 芳香胺N-乙酰化轉移酶抗體100 ul
鮮綠青霉AT2R2 血管緊張素Ⅱ受體2抗體100 ug
膨端青霉Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體100 ug
粟酒裂殖酵母TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗體100 ug
降酮短桿菌AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體100 ul
格氏李斯特氏菌TDRD9/HIG1 缺氧誘導蛋白HIG1抗體100 ug
布雷正青霉SIRT1/sirtuin 1 沉默調節蛋白1抗體100 ul