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東曹(上海)生物科技有限公司

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單克隆抗體非變性SEC-MS分析用色譜柱的選擇

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單克隆抗體的表征對于產品的安全性和有效性至關重要。確定純度和表征二聚體或片段等雜質是兩個關鍵的質量參數。尺寸排阻色譜法與質譜聯合使用在測定mAb精確分子量方面的應用也越來越廣泛。然而,即使在高分子量m/z范圍內執行操作,傳統SEC一般都會產生大量的顆粒脫落,導致電離效率隨時間推移逐漸降低。為避免MS和多角度光散射檢測時產生顆粒脫落,東曹開發了TSKgel® UP-SW3000-LS U/HPLC尺寸排阻色譜柱。本應用中,我們使用了TSKgel UP-SW3000-LS色譜柱與MS對mAb標準品進行了分析。數據表明,就MS觀察到的顆粒脫落而言,TSKgel UP-SW3000-LS色譜柱優于競品UHPLC色譜柱和蛋白質SEC專用低脫落色譜柱。此外,與50次以上的初始進樣相比,該色譜柱有助于將電噴霧電離(ESI)源的電離效率保持在90%以上。

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