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液相常用檢測器

閱讀:3942      發(fā)布時間:2017-5-31
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液相常用檢測器

HPLC中常用的檢測器分有如下幾種,紫外吸收檢測器(UVD)、二極管陣列檢測器(PDAD)、熒光檢測器(FLD)、示差折光檢測器(RID)、蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)、質(zhì)譜檢測器(MSD)等。

 

選擇性檢測器

1紫外吸收檢測器(UVD是目前HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測器。它的主要特點是靈敏度高,線性范圍寬,對流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫。它要求被檢測樣品組分有紫外吸收,屬于選擇性檢測器。

2二極管陣列檢測器(PDAD20世紀80年代才出現(xiàn)的一種光學多通道檢測器,它可以看作是UVD的一個分支。在對每個洗脫組分進行光譜掃描,經(jīng)計算機處理后,得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性(確證是否是單一純物質(zhì)),色譜用于定量,常用于復雜樣品(如生物樣品、中草藥)的定性定量分析。

3熒光檢測器(FLD同樣屬于選擇性檢測器,其靈敏度在目前常用的HPLC檢測器中是zui高的,應(yīng)用也較多,僅次于UVD。它適用于能激發(fā)熒光的化合物。很多與生命科學有關(guān)的物質(zhì),如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測。熒光檢測器在生物樣品痕量分析中很有用,尤其在用熒光衍生后,可以檢測很微量的氨基酸和肽。
通用型檢測器

1示差折光檢測器(RID是一種通用型檢測器,只要被測組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用。生命科學中常遇到各類糖類化合物,沒有紫外吸收,一般常用示差折光檢測器。它的通用性比UVD廣,但靈敏度要低,對溫度變化敏感,并與梯度洗脫不相容,因而限制了它的使用。

2蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD也是一種通用型的檢測器,可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品,而不需要樣品含有發(fā)色基團。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。ELSD靈敏度比RID高,對溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,可用于梯度洗脫。現(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。

 

3質(zhì)譜檢測器(MSD是另一種通用型檢測器,在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點。但它的昂貴操作費用和復雜性限制了它的推廣應(yīng)用。

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