1、根據比耳(Beer)定律：當一束平行單色光通過溶液時，由于溶液吸收光能量會導致光強度降低。并且某一單色光束通過溶液時，吸光度與被測溶液的濃度成線性關系，這就是分光光度分析定量的理論根據。測定某一液的濃度的變化可以通過測定其吸光度的變化來實現。也就是說測定溶液的吸光度，就可以得到其相應溶液濃度的數值，這就是分光光度計的基本原理，通過分光光度計可以進行溶液的比色分析。
2、比耳定律只有在入射光是單色光的前提下才能成立。單色光是一個理論概念實際中使用濾光片來使入射光線接近理論上的單色光。高級的分光光度計或酶標儀具備有多個波長段的濾光片可供選擇，而且濾光片的性能是非常良好的，以提高儀器的分辨率，減少散光。
3、酶標儀是由一個分光光度計和微處理機構成的，因而它也叫酶標判讀儀或酶標分光光度計。因而它的光學原理跟分光光度計的原理是相同的。它主要是用于測定酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的微量反應板上各孔的光吸收值。通過測量各微孔的光吸收值來測定出各孔中溶液的濃度，而濃度的數值則可說明這個試驗反應中抗原抗體的結合反應情況。
4、由于聯用了微處理機不但能完成光譜數據的測定和計算，而且提高了儀器的自動化程度。例如自動調零、自動篩選和設置參數、設置上下限、自動記錄和自動打印等。酶標儀測定的原理是在特定波長下檢測被測物的吸光值。
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