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密度梯度離心實驗

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用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。
這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。
A等速度沉降,B等密度沉降
速度沉降(velocity sedimentation)主要用于分離密度相近而大小不等的細胞或細胞器。這種沉降方法所采用的介質密度較低,介質的zui大密度應小于被分離生物顆粒的zui小密度。生物顆粒(細胞或細胞器)在十分平緩的密度梯度介質中按各自的沉降系數以不同的速度沉降而達到分離。
等密度沉降(isopycnic sedimentation)適用于分離密度不等的顆粒。細胞或細胞器在連續梯度的介質中經足夠大離心力和足夠長時間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質處,并停留在那里達到平衡,從而將不同密度的細胞或細胞器分離。介質的zui高密度應大于被分離組分的zui大密度,而且介質的梯度要求較高的陡度,不能太平緩。這種方法適于分離細胞器,而不太適于分離和純化細胞。

 

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