實(shí)驗(yàn)方法原理    原代細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物種類(lèi)很多．常用的主要有滅活的仙臺(tái)病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和電脈沖。目前應(yīng)用zui廣泛的是聚乙二醇，因?yàn)樗椎谩⒑?jiǎn)便，且融合效果穩(wěn)定。PEG的促融機(jī)制尚不*清楚，它可能引起細(xì)胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團(tuán)發(fā)生結(jié)構(gòu)重排。
實(shí)驗(yàn)材料    
雞紅細(xì)胞
試劑、試劑盒    
PEGHanks液
儀器、耗材    
顯微鏡離心機(jī)水浴箱離心管試管載玻璃片蓋玻片
實(shí)驗(yàn)步驟    1.  取新鮮雞血以0.85%生理鹽水制成10%的懸液。

2.  稱取0.5克PEG（MW=4 000）放入試管內(nèi)，在酒精燈上融化之，迅速加入0.5 ml 預(yù)熱的Hanks液混勻制成50%的PEG溶液。放入37℃水浴中待用。

3.  取上述10%的雞紅細(xì)胞懸液1 ml 放入離心管中，再加入5 ml Hanks液混勻，然后以1 000 rpm 離心5分鐘，小心棄去上清，用指彈法將細(xì)胞團(tuán)塊彈散。

4.  取上述50%PEG溶液0.5 ml，在1分鐘內(nèi)滴加到雞紅細(xì)胞懸液，邊加邊輕輕搖動(dòng)混勻。待PEG全部加入后靜置1分鐘左右。此全部過(guò)程都要求在37℃水浴內(nèi)進(jìn)行。

5.  緩慢滴加9 ml Hanks液以終止PEG的作用，在37℃水浴內(nèi)靜置5分鐘。

6.  離心棄上清后，取一滴融合后的細(xì)胞懸液滴片，加蓋片鏡檢。

7.  結(jié)果觀察：在高倍鏡下可以看到有兩個(gè)或兩個(gè)以上的雞紅細(xì)胞膜融合在一起，形成一個(gè)異核體細(xì)胞。要注意辨別融合細(xì)胞與重疊的雞紅細(xì)胞。

8.  融合率的計(jì)算：在高倍鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞（包括融合的與未融合的細(xì)胞），以融合原代細(xì)胞（含兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞核的細(xì)胞）的細(xì)胞核數(shù)除以總細(xì)胞核數(shù)（包括融合與未融合的細(xì)胞核）即得出融合率。
Terconazole    200mg    曲康唑標(biāo)準(zhǔn)品    67915-31-5 
Terfenadine    200mg    特非那定標(biāo)準(zhǔn)品    50679-08-8 
Terfenadine Related Compound A    100mg    特非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    76815-60-6 
Terfenadine Related Compound B    50mg    特非那定相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品    
Terpin Hydrate    750mg    萜品標(biāo)準(zhǔn)品    2451/1/6
tert-Butylmethyl ether    1.2ml×3ampules    甲基叔丁基醚標(biāo)準(zhǔn)品    1634-04-4
Testolactone CIII    125mg    睪內(nèi)酯酮標(biāo)準(zhǔn)品    968-93-4 
Testosterone CIII    125mg    睪酮標(biāo)準(zhǔn)品    58-22-0 
Testosterone Cypionate CIII    200mg    環(huán)戊丙酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)品    58-20-8 
Testosterone Enanthate CIII    200mg    庚酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)品    315-37-7 
Testosterone Propionate CIII    200mg    丙酸睪丸素標(biāo)準(zhǔn)品    57-85-2 
原代細(xì)胞