大鼠支氣管平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區別就是，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力，保持支氣管形態；②支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節機制是支氣管正常生理功能的基礎；③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質，發揮免疫調節功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

LAN-5細胞，神經母細胞瘤細胞 人胎盤絨毛癌細胞,JAR細胞 人表皮角質細胞RNAHEK miRNA5 μg  胰腺癌組織源性原代細胞Many 1ml  786-O[786-0]細胞，腎透明細胞腺癌細胞 單核細胞白血病細胞,J-111細胞 兔原代小腸粘膜上皮細胞 人原代淋巴管內皮細胞

Claudin-11 peptide 少突膠質細胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質細胞跨膜蛋白抗原

HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白

CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein

VCAM1 Protein Mouse 重組小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 標簽)

RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標簽) Protein

大鼠肉毒堿棕櫚酰基轉移酶2(CPT2)試劑盒 ，英文名： CPT2 ELISA Kit

Mouse angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

RatThyroglobulin,TGELISAKit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGzms-A(MousegranzymesA)ELISAKit小鼠顆粒酶A

細胞長鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次

Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒規格：96T/48T

兔粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔肝細胞生長因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔透明質酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔心脂肪酸結合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

大鼠支氣管平滑肌原代細胞小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神經生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

DuckIerleukin2,IL-2試劑盒鴨白介素2(IL-2)試劑盒規格：96T/48T

棗椰樹(datepalm)培養基500毫升溶液/片劑

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脫氫表雄同(DHEA)試劑盒規格：96T/48T

GAD2重組小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein

骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)

SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。