詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:SREBP抑制劑(Betulin)
英文名稱:Betulin
產品規格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Betulin是一種SREBP抑制劑,在K562細胞中的IC50值是14.5μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:473-98-3 別名:Trochol 純度:98.0% 分子量:442.72 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
節桿菌Paenibacillus macerans
桃色枝頂孢Bacillus subtilis
鍺栓孔菌 Paenibacillus polymyxa
味側耳(紫孢側耳)Paenibacillus polymyxa
斑玉蕈Paenibacillus macerans
鏈霉菌Paenibacillus macerans
草木樨中華根瘤菌Paenibacillus polymyxa
蠟樣芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa
掘氏疫霉*Paenibacillus polymyxa
黃曲霉Bacillus licheniformis
果生鏈核盤菌Paenibacillus polymyxa
泡盛曲霉Paenibacillus polymyxa
櫟生青霉Bacillus cereus
長柄鏈格孢Bacillus cereus
阿維菌鏈霉菌Bacillus cereus
鼠傷寒沙門氏菌Bacillus cereus
磷化指狀蛋白RET抗體草假單胞菌雪白彎頸霉
胰島單克抗體巴阿里假單胞菌雪白曲霉
磷化雷帕霉靶蛋白復合體2抗體以色列色鹽桿菌彎孢霉屬菌種
磷化Runx3抗體鹽脫氮枝芽孢桿菌田無鏈霉菌
SREBP抑制劑(Betulin)Phospho-Syk (Tyr525 + Tyr526) 英文名稱: 磷酸化非受體型酪酸蛋白激酶抗體 0.1ml
E2F7 英文名稱: 轉錄調節因子E2F7抗體 0.2ml
分泌型卷曲相關蛋白1抗體 anti-SFRP1 0.2ml
Anti-TCF7L2/FITC 熒光素標記轉錄因子7類似物2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規格 0.1ml
Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)