詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DY131 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
DY131(GSK9089)是ERRβ和ERRγ選擇性激動劑,對ERRα,ERα和ERβ的活性極低。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:95167-41-2 別名:GSK 9089 分子量:311.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
分枝節桿菌Rhodotorula glutinis
炭疽芽胞桿菌Geotrichum candidum
纖細雙歧桿菌Geotrichum candidum
克魯斯假絲酵母Pichia burtonii
構巢曲霉Saccharomyces cerevisiae
臭曲霉Candida rugosa
丁香假單胞桿菌番茄致病變種*Trichosporon cutaneum
松口蘑Yarrowia lipolytica
球黑孢霉Candida rugosa
豐加鏈霉菌灰白亞種Yarrowia lipolytica
釀酒酵母Candida rugosa
生暗灰鏈霉菌Candida rugosa
沙福芽孢桿菌Yarrowia lipolytica
芽胞桿菌屬Trichosporon capitatum
平菇Candida tropicalis
金黃殼囊孢Candida tropicalis
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒大腦蛋白2抗體人甲狀腺抗體(TAb)去氫駱駝蓬堿
小鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)免疫試劑盒B轉錄激活因子抗體人甲狀腺抗體(TAb)去氫毛鉤藤堿
小鼠長停滯特異性基因產物6(gas-6)免疫試劑盒BCL6B抗體人胰島抗體(ICA)去氫木香內酯
小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)免疫試劑盒BAP31蛋白抗體人胰島抗體(ICA)去氫松香
ERRβ和ERRγ激動劑(DY131)2-Dec 英文名稱: 轉錄調節因子DEC2抗體 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834) 英文名稱: 磷酸化轉錄接頭蛋白EP300抗體 0.1ml
抗鳥氨酸脫羧酶抗體 anti-ODC 0.1ml
Anti-Smad7/FITC 熒光素標記Smad 7抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規格 0.1ml
Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1 免疫球蛋白結合蛋白-1Multi-class antibodies規格: 0.5mg