商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

膜醭畢赤酵母Halomonas subglaciescola兔抗平滑肌抗體(ASMA)

硬皮地星Lactobacillus plantarum兔子白介9(IL-9)

蠟蚧菌Rhizobium radiobacter兔子白介9(IL-9)

白色短波單胞菌Lactobacillus plantarum兔載脂蛋白A1(apo-A1)

楊盤二孢（都不提供）Lactobacillus rhamnosus兔載脂蛋白A1(apo-A1)

pBudCE4.1Lactobacillus plantarum兔纖溶抗纖溶復合物(PAP)

大腸埃希氏菌Rhodobacter sphaeroides兔纖溶抗纖溶復合物(PAP)

枯草芽孢桿菌Stenotrophomonas maltophilia兔纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)

蠟狀芽孢桿菌Enterobacter aerogenes兔纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)

高盧蜜環菌（可訂購）Enterobacter aerogenes兔子白介2(IL-2)

靈芝Enterobacter aerogenes兔子白介2(IL-2)

海芋平臍蠕孢Enterobacter cloacae兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)

大毛霉Alcaligenes faecalis subsp. faecalis兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)

熱帶靈芝Salinicoccus roseus兔一氧化氮(NO)

腫囊腐霉Bifidobacterium thermophilum兔一氧化氮(NO)

腫塊芽孢桿菌屬Salinicoccus hispanicus兔補體蛋白3(C3)

腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體紫黑杜搟氏菌Deinococcus radiodurans

Toll樣受體6抗體白鉤鏈霉菌(白丘鏈霉菌)Salinicoccus luteus

Toll樣受體9抗體乳桿菌Rufibacter roseus

組織因子途徑抑制劑抗體尖鐮孢萎蔫?；停ㄐ泵妫┐竽c埃希氏菌DH5α/pET43.1a-PknA
mRNA水平抑制劑(KNK437)間型彎孢 纖維透析袋（100000）

竹瘤座 D-乳酸脫氫

農藥測定浸提液 （固體） 甘油激

蕈青霉 纖維透析袋（300000）

釀酒酵母 銀杏內酯A

梭屬 乙脫氫

居巖牙殖球 沒食子兒茶沒食子酸酯

釀酒酵母 普魯蘭