PARP抑制劑(BMN-673 8R,9S)公司正在出售的產(chǎn)品：Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌株)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

溜曲霉Burkholderia cepacia兔子雌二(E2)

韋伯靈芝Burkholderia gladioli兔子腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)

暗產(chǎn)色鏈霉菌Stenotrophomonas maltophilia兔子腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)

短波單胞菌Achromobacter xylosoxidans兔子表皮生長因子(EGF)

黃海克錫勒氏菌Achromobacter xylosoxidans兔子表皮生長因子(EGF)

枯草芽孢桿菌Stenotrophomonas maltophilia兔子白血病抑制因子受體(LIFR)

釀酒酵母Pseudomonas oleovorans兔子白血病抑制因子受體(LIFR)

釀酒酵母Burkholderia cepacia兔子白三烯B4(LTB4)

產(chǎn)堿假單胞菌Streptococcus oligefermentans兔子白三烯B4(LTB4)

芬萊氏鏈霉菌Burkholderia cepacia兔子白介8(IL-8/CXCL8)

靈芝屬Streptococcus oligefermentans兔子白介8(IL-8/CXCL8)

大腸桿菌Streptococcus oligefermentans兔子白介6(IL-6)

傷寒沙門氏菌Achromobacter xylosoxidans兔子白介6(IL-6)

康寧木霉Streptococcus oligofermentans兔子白介4(IL-4)

枯草芽孢桿菌Brevibacillus laterosporus兔子白介4(IL-4)

仙臺鏈霉菌Brevibacillus choshinensis兔子白介3(IL-3)

信號通路WNT10A抗體褐色綠僵菌巴塞爾沙門氏菌

信號通路Wnt9a抗體桑格娜氏鏈霉菌盧敦沙門氏菌

WRCH1抗體葡萄牙鏈霉菌愛爾貝克沙門氏菌

絲/蘇激家族成員的基因WNK3抗體微紅黃色粘球菌(橙色粘球菌)摩亞沙門氏菌
PARP抑制劑(BMN-673 8R,9S)邊緣假單胞 過氧化物（辣根）

釀酒酵母 過氧化物（辣根）

金灰青霉 透明質(zhì)酸

串珠霉屬 膠原

阿穆爾斯克灣鹽地桿 莽草酸

雅致放射毛霉 膠原

惡臭假單胞 膠原

大麗輪枝霉 蒙花苷

矮抗P558（平菇類） 膠原

白黃側(cè)耳 膠原

亮環(huán)紋炭團(tuán) 膠原

藍(lán)微褐鏈霉 沒食子酸

嗜鹽鹽漬微 膠原

沉積物漠河桿 乳酸脫氫（兔肌）

圓紅球 蛋白（枯草桿）