詳細介紹
商品介紹:
CCT244747是一個強的,高選擇性的,能夠,ATP競爭的CHK1抑制劑,IC50是29-170nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1404095-34-6 純度:98.0% 分子量:408.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:CHK1抑制劑(CCT244747)
英文名稱:CCT244747
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
迪維爾希氏菌屬大鼠胰島樣生長因子結合蛋白2Anti-SYCP3 Antibody人組織因子(TF)
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種大鼠胰島樣生長因子結合蛋白1Anti-SYCP2 Antibody人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)
釀酒酵母人抗丁型肝炎病抗體Anti-SVOP Antibody人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)
弗氏鏈霉菌人抗型肝炎病抗體Anti-SYK Antibody人血小板因子4(PF-4/CXCL4)
釀酒酵母大鼠血管內皮生長因子受體1Anti-SYT11 Antibody人血小板因子4(PF-4/CXCL4)
釀酒酵母人抗斑疹傷寒抗體Anti-SYT16 Antibody人淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)
雙乳突炭層菌大鼠血管內皮生長因子受體2Anti-SYT13 Antibody人淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)
大腸埃希菌人單核增多性李斯特菌OAnti-SYNE3 Antibody人白三烯E4(LTE4)
大腸埃希氏桿菌大鼠肝生長因子Anti-SYT11 Antibody人白三烯E4(LTE4)
冷湖黃桿菌人乙型肝炎病X抗原Anti-SYT13 Antibody人D二聚體(D2D)
赫倫魏斯氏菌大鼠糖蛋白130Anti-TAAR5 Antibody人D二聚體(D2D)
淡紫擬青霉大鼠生長激Anti-SYTL4 Antibody人免疫球蛋白E(IgE)
一色齒毛菌人腺相關病Anti-TAAR3P Antibody人免疫球蛋白E(IgE)
耐輻射奇球菌大鼠粒集落激因子Anti-TAB3 Antibody人髓系觸發受體-1(TREM-1)
黃曲霉人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Anti-TACC3 Antibody人髓系觸發受體-1(TREM-1)
*芽胞桿菌(Bacillus atrophaeus)ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)人傷寒抗原Anti-TADA2A Antibody人白調節(LR)
環指蛋白9抗體棱柱散尾菌中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤
酪相關蛋白1抗體納豆芽孢桿菌小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞
腫瘤血管內皮標志物8抗體惡疫霉HBL-1細胞*培養基
tinagl1抗體桑殼小圓孢菌無血清凍存液 Cell Freezing Medium
CHK1抑制劑(CCT244747)乳酸乳球乳亞種 右旋四氫巴馬
銅綠假單胞 原百部次堿
香菇 原百部堿
藤黃微球 雅姆皂苷元
太平洋楊惠芳氏 3-乙酸南楝屬二酯
維涅蘭德固氮 乙酰基二氫味草A
匿名曲霉 羽扇烯酮
薛瓦酵母 葉綠
枯草芽孢桿枯草亞種 鹽酸
根瘤 異甜菊
盤長孢狀盤孢 野鷲尾苷
釀酒酵母 3-乙酰基乳香酸
鏈霉(白色類群) *泊苷
釀酒酵母 鹽酸羅酮
瘤胃脫硫腸狀 鹽酸吡酮