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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Icotinib Hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
Icotinib Hydrochloride(BPI-2009)是有效，選擇性的EGFR抑制劑，IC50值為5nM；也抑制突變型EGFRL858R，EGFRL858R/T790M，EGFRT790M和EGFRL861Q。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1204313-51-8 別名：BPI-2009H 純度：99.95% 分子量：427.88 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
叢赤殼屬Burkholderia sp.豬血管生成2(ANG-2)
矩圓黑盤孢Kocuria palustris豬血管生成受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激2(Tie-2)
葡萄座腔菌Sphingomonas sp.豬血管生成受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激2(Tie-2)
白色假絲酵母*Brevundimonas sp.豬血管生成1(ANG-1)
根瘤菌Desulfovibrio desulfuricans subsp. desulfuricans豬血管生成1(ANG-1)
假單胞菌Desulfovibrio fructosivorans豬乙酰受體抗體(AChRab)
蘇云金芽胞桿菌幕蟲亞種Desulfotomaculum ruminis豬乙酰受體抗體(AChRab)
溫特曲霉原變種Geobacillus thermoglucosidasius豬熱休克蛋白90(HSP-90)
季也蒙假絲酵母Geobacillus thermoleovorans豬熱休克蛋白90(HSP-90)
細鏈格孢Aneurinibacillus migulanus豬熱休克蛋白70(HSP-70)
青枯假單胞菌*Sporolactobacillus inulinus豬熱休克蛋白70(HSP-70)
產克雷伯氏菌Desulfobacterium macestii豬熱休克蛋白40(HSP-40)
糾纏青霉Ureibacillus thermosphaericus豬熱休克蛋白40(HSP-40)
腸外致病性大腸桿菌Desulfomicrobium escambiense豬熱休克蛋白20(HSP-20)
灰腐質霉Brevibacillus thermoruber豬熱休克蛋白20(HSP-20)
禽腺病Ⅷ型Sporosarcina globispora豬C反應蛋白(CRP)
S100鈣結合蛋白P抗體鏈狀粘帚霉特福奈斯特沙門氏菌
12脂氧合抗體煙草布方丹沙門氏菌
轉錄因子SOX9蛋白抗體玫煙色棒束孢阿氏耶爾森氏菌
滑膜肉瘤X斷點蛋白8抗體細腳棒束孢（斜面）羅氏耶爾森氏菌
EGFR抑制劑（Icotinib Hydrochloride）SET 英文名稱： SET易位蛋白/髓系白血病相關蛋白抗體 0.1ml
EphA2 英文名稱： 內皮細胞受體蛋白酪酸激酶抗體 0.1ml
核糖核蛋白抗原SSA抗體 Anti-SSA/RO 0.1ml
Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標記磷酸化血管生成素受體2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 規格 0.1ml
Kir6.2 peptide ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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