商品介紹：
GW4869是非競爭性的中性鞘磷脂酶抑制劑，IC50值為1μM。
注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！
CAS號：6823-69-4
純度：96.35%
分子量：577.5
儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。
產品屬性：
中文名稱：中性鞘磷脂酶抑制劑(GW4869)
英文名稱：GW4869
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5

商品介紹：

產品屬性：

中文名稱：中性鞘磷脂酶抑制劑(GW4869)

英文名稱：GW4869

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

蛋白聚糖4(PRG4)ELISA Kit英文名稱：PRG4 ELISA Kit磷化自噬相關蛋白3抗體包裝5g

蛋白激B(PKB)ELISA Kit英文名稱：PKB ELISA Kit縮2抗體包裝1g

蛋白激A(PKA)ELISA Kit英文名稱：PKA ELISA Kit胰腺α淀粉抗體包裝25g

蛋白C(Protein C)ELISA Kit英文名稱：Protein C ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白11抗體包裝5g

膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)ELISA Kit英文名稱：CCK ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100mg

膽囊收縮(CCK)ELISA Kit英文名稱：CCK ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝100mg

膽堿乙酰轉移(ChAT)ELISA Kit英文名稱：ChAT ELISA Kit固還原家族1成員D1抗體包裝25g

膽堿磷甘油酯(PC/CPG)ELISA Kit英文名稱：PC/CPG ELISA Kit肝血管生成相關蛋白抗體包裝5g

膽固酯轉移蛋白(CETP)ELISA Kit英文名稱：CETP ELISA Kit自解結構域5蛋白抗體包裝25g

膽固(CH)ELISA Kit英文名稱：CH ELISA Kit酰基硫酯8包裝5g

單核細胞趨化蛋白5(MCP-5)ELISA Kit英文名稱：MCP-5 ELISA Kit溶血磷脂酰基轉移β抗體包裝25g

單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit英文名稱：MCP-4/CCL13 ELISA KitAFP4b蛋白抗體包裝5g

單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit英文名稱：MCP-3/CCL7 ELISA Kit載脂蛋白C2抗體包裝100g

單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA Kit英文名稱：MCP-2/CCL8 ELISA Kit載脂蛋白A5抗體包裝25g

單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA Kit英文名稱：MCP-1 ELISA Kit載脂蛋白A2抗體包裝5g

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）結締組織生長因子(CTGF)CGK733 是一種有效的 ATM/ATR 抑制劑，用于癌癥研究。
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雙鏈RNA腺苷脫抗原磺加貝酯（標準品）Human, Mouse, Rat

質金屬蛋白9磺羅（標準品）Human

牛結核桿菌菌體蛋白磺帕珠沙星（標準品）Human, Mouse

Muellerian抑制因子抗原磺培氟沙星（標準品）Human

AEG-1抗原磺齊拉西（標準品）Human, Mouse

血小板內皮黏附分子-1（抗原）磺伊馬替尼（標準品）Human, Mouse, Rat

脂肪組織分化相關蛋白抗原斑蝥（標準品）Human, Mouse, Rat

免疫球蛋白結合蛋白-1丁香酚（標準品）Human, Mouse, Rat