產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Trk抑制劑(GNF-5837)
英文名稱:GNF-5837
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GNF-5837是Trk抑制劑,對表達融合蛋白Tel-TrkC,Tel-TrkB和Tel-TrkA的細胞IC50分別為7,9和11nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1033769-28-6 純度:97.22% 分子量:535.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
運動節(jié)桿菌人卷曲蛋白8Bacillus thuringiensis小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)
南類芽孢桿菌人蝸牛同源物2Bacillus thuringiensis小鼠蛋白激B(PKB)
球孢白僵菌人高爾基蛋白73Bacillus thuringiensis小鼠蛋白激B(PKB)
花生生莖點霉人TU3A蛋白Bacillus thuringiensis小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)
大腸埃希菌人電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽Bacillus thuringiensis小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)
南冰川酵母人皮膚蛋白Bacillus thuringiensis subsp. alesti小鼠血紅氧合2(HO-2)
鏈格孢人可溶性蛋白185Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus小鼠血紅氧合2(HO-2)
嗜鹽沉積物桿菌人降解加速因子Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)
大腸埃希菌人T活化連接蛋白Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)
更新世肉桿菌人SH2攜帶蛋白Bacillus thuringiensis subsp. finitimus小鼠促卵泡(FSH)
解淀粉芽孢桿菌人B連接蛋白Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus小鼠促卵泡(FSH)
假單孢菌人尿相關(guān)蛋白CBacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
米曲霉人銜接蛋白活化因子1Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
葡萄酒有孢漢遜酵母人錨蛋白BBacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
曲霉人潛伏膜蛋白1Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
猴頭人重組激活基因2Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)
骨保護蛋白/護骨抗體迷孔肉色扇小鼠胚胎成纖維細胞,經(jīng)mitomycin-C處理,P3,300萬細胞(干細胞庫保藏)
骨保護蛋白配體抗體破骨細胞分化因子小白菇人羊膜細胞
骨橋蛋白抗體分泌型磷蛋白1人大紅菇人巨細胞白血病細胞株
增食欲A/欲激A褪色紅菇急性T淋巴細胞白血病細胞
Trk抑制劑(GNF-5837)蠟狀芽孢桿 苔黑龍膽二糖苷
側(cè)孢霉 G418硫酸鹽
相思根瘤 反式茴香腦
枯草芽孢桿 霉
東京根霉 法林二
疣鏈霉
秦氏蜜環(huán) 醋酸棉
網(wǎng)紋灰包 鹽酸林可霉
鉛黃腸球 柚皮苷二氫查爾酮
果生鏈核盤 山姜
漢遜德巴酵母漢遜變種 氨芐青霉
米曲霉 D-生物
楊樹口蘑 氨芐青霉鈉
根霉 兩性霉B
冬蟲夏草 異澤蘭黃
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)