詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ZM 336372 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
ZM336372是c-Raf抑制劑,IC50為70nM,比對B-RAF的抑制性高10倍,對PKA/B/C,AMPK和p70S6無活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:208260-29-1 純度:96.79% 分子量:389.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
平菇—8804Pseudomonas stutzeri大鼠胃腸癌標志物CA199
枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas stutzeri大鼠血紅氧合1(HO-1)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠血紅氧合1(HO-1)
聚多曲霉Pseudomonas stutzeri大鼠磷脂A2(PL-A2)
黑曲霉Pseudomonas stutzeri大鼠磷脂A2(PL-A2)
香菇Pseudomonas stutzeri大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)
大腸埃希菌Pseudomonas stutzeri大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)
橘青霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白5(AQP-5)
波蘭青霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白5(AQP-5)
細孢毛霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白4(AQP-4)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白4(AQP-4)
綠色木霉Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白3(AQP-3)
無Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白3(AQP-3)
葡萄座腔菌Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白1(AQP-1)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas synxantha大鼠水通道蛋白1(AQP-1)
異常威克漢姆酵母Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白0(AQP-0)
腦質膜單胺轉運蛋白PMAT抗體銀白離褶傘鎂(Mg)比色法測試盒
白細胞介1受體相關蛋白抗體長根菇鋅(Zn)比色法測試盒
多配體聚糖4抗體洛巴伊口蘑(金福菇)鉀離子(K)比濁法測試盒
血小板源性生長因子D脊髓源性生長因子B桃紅側耳銅(Cu)比色法測試盒
c-Raf抑制劑(ZM 336372)尖孢鐮刀 硫酸軟骨
紅緣層孔 土荊皮乙酸
雪白根霉 色C
中華游動微 穗花杉雙黃酮
大孔多孔 色C
芽枝狀枝孢 沙苑子苷A
短小芽孢桿 色C
腸膜明串珠 巴豆苷
阿姆斯特丹曲霉 植物血球凝集
球毛殼 黃杞苷
多色青霉 水晶蘭苷
嗜熱脂肪地芽孢桿 8-O-乙酰山梔苷甲酯
釀酒酵母 大車前苷
云芝 DL3000 DNA Marker
花生網斑病* 表告依春