以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱英文名稱產品規格發貨周期
ONO-4059 hydrochloride1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg1～3天

商品介紹：
ONO-4059的IC50值是2.2nm，是一種有選擇性和新穎的抑制劑。在B細胞中ONO-4058結合BTK，因此阻止B細胞受體信號和阻礙B細胞的發展。
注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

柑橘炭疽盤孢Bacillus subtilis subsp. subtilis

枯草芽孢桿菌Bacillus alvei

解淀粉芽胞桿菌Bacillus alvei

固氮野野村氏菌Bacillus anthracoides

灰黃青霉Bacillus anthracoides

大腸埃希菌Bacillus lichenitormis

杰氏假單胞菌Bacillus megaterium

擬枝孢鐮孢Bacillus megaterium

MarisediminicolaBacillus thuringiensis

炭黑曲霉Bacillus sp.

根瘤菌Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

莫哈韋芽孢桿菌Bacillus thuringiensis

金針12Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

細枝農霉菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

呼倫貝爾無色需堿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

磷化酪磷α抗體薄樹靈芝飼料類芽孢桿菌

磷化端粒結合蛋白P23抗體新日本靈芝人皰疹病毒2型

磷化蛋白酪激9抗體擬革蓋菌人輪狀病毒

磷化蛋白激C/p-PKCε抗體卷邊網褶菌極梅奇酵母
B細胞受體抑制劑(ONO-4059 hydrochloride)SDCCAG10 英文名稱： 結腸癌抗原10抗體 0.2ml

ERCC6L 英文名稱： 發育相關蛋白ERCC6L抗體(乙醇致畸因子) 0.2ml

一種抑制基因 Anti-PTEN/MMAC1 0.1ml

Anti- Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標記核突觸蛋白-α抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1234/1235) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 規格 0.1ml

HIV gp120 艾滋病病毒(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg