詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Dipyridamole | 1mL(10mM)|100mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Dipyridamole(Persantine)是磷酸二酯酶抑制劑,能阻斷紅細胞和血管內皮細胞對腺苷的吸收和代謝。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:58-32-2 純度:99.14% 分子量:504.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
蛋白激活受體3(PAR3)ELISA Kit英文名稱:PAR3 ELISA Kitα1-chimaerin蛋白抗體包裝25g
蛋白激活受體2(PAR2)ELISA Kit英文名稱:PAR2 ELISA Kit信號轉導蛋白9復合體7b抗體包裝5g
蛋白3(PR3)ELISA Kit英文名稱:PR3 ELISA Kit鈣調神經磷調節蛋白1抗體(唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白1)包裝1g
蛋白磷3調節因子亞基1(PPP3R1)ELISA Kit英文名稱:PPP3R1 ELISA Kit鈣調神經磷調節蛋白3抗體(唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白3)包裝5g
蛋白酪磷受體O(PTPRO)ELISA Kit英文名稱:PTPRO ELISA KitCentaurin α1抗體包裝1g
蛋白酪磷受體H(PTPRH)ELISA Kit英文名稱:PTPRH ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體包裝5g
蛋白激抑制因子γ(PKIγ)ELISA Kit英文名稱:PKIγ ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11B抗體包裝25g
蛋白激抑制因子β(PKIβ)ELISA Kit英文名稱:PKIβ ELISA Kit鈣平衡調節蛋白1抗體包裝5g
蛋白激N2(PKN2)ELISA Kit英文名稱:PKN2 ELISA Kit阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關膠原蛋白抗體包裝100mg
蛋白激D1(PRKD1)ELISA Kit英文名稱:PRKD1 ELISA Kit老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS1抗體包裝1g
蛋白激Cη(PKCη)ELISA Kit英文名稱:PKCη ELISA Kit凋亡誘導蛋白NALP3抗體包裝25g
蛋白激Cζ(PKCζ)ELISA Kit英文名稱:PKCζ ELISA Kit豬圓環病Ⅱ型衣殼蛋白抗體包裝5g
蛋白激Cε(PKCε)ELISA Kit英文名稱:PKCε ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體包裝25g
蛋白激Cδ(PKCδ)ELISA Kit英文名稱:PKCδ ELISA Kit干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g
蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA Kit英文名稱:PICK1 ELISA Kit離子通道蛋白6抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:purity>99.0%,BR魚精蛋白1試劑盒葉黃;Xanthophyll
粗壯假絲酵母Candida│valida 質量規格:HPLC>99%,標準品誘導型一氧化氮合成試劑盒愈創木酚;Guaiacol
: Charwoman資源名稱: 鏈球菌 質量規格:含量>99.0%有絲分裂原活化蛋白激14試劑盒異丁香酚;Isoeugenol
磷酸二酯酶抑制劑(Dipyridamole)兔抗雞IgG抗血清雙(3--1--5-吡唑啉)[用于硝棉,維生B12等的測定] Bis(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone) [for Determination of CN, Vitamin B12, etc]>97.0%(T)Human, Mouse, Rat
兔抗雞IgM抗血清2-并惡唑 2-Benzoxazolinone >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat
兔抗狗IgG抗血清雙(4-)二硫 Bis(4-nitrophenyl) Disulfide >95.0%(GC)Human, Mouse, Rat
兔抗羊IgM抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat
兔抗豚鼠IgG抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat
兔抗豚鼠IgM抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human
兔抗人IgG抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human
兔抗人IgM抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse, Rat
兔抗猴IgG抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse