詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Pyridone 6 | 1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Pyridone6是一種泛JAK抑制劑,有效抑制JAK激酶家族,作用于JAK2,TYK2,JAK3和JAK1,IC50分別為1nM,1nM,5nM和15nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:457081-03-7 別名:CMP 6;JAK Inhibitor 純度:98.89% 分子量:309.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
青枯假單胞菌CC趨化因子受體3抗原Anti-CD177 AntibodyRIO激3(RIOK3)
福山淺黃酵母表面趨化因子受體2A抗原Anti-CD1E AntibodyRIO激2(RIOK2)
小葉相思根瘤菌表面趨化因子受體4抗原Anti-CD1B AntibodyRIO激1(RIOK1)
不高雙孢菌表面趨化因子受體6抗原Anti-CD1C AntibodyRififylin蛋白(RFFL)
藍微褐鏈霉菌表面趨化因子受體6抗原Anti-CD200 AntibodyRhoGDP解離抑制因子α(ARHGDIα)
三孢布霉CC趨化因子受體7(多肽)Anti-CD200R1 AntibodyRho蛋白2(RHPN2)
球孢白僵菌CXCL10趨化因子10/干擾誘導蛋白10抗原Anti-CD200R1 AntibodyRho蛋白1(RHPN1)
食砜節桿菌血管內皮生長因子(多肽抗原)Anti-CD209 AntibodyRhotekin2蛋白(RTKN2)
新城疫病CD10抗原Anti-CD226 AntibodyRhotekin蛋白(RTKN)
串珠鐮孢ZCWCC1抗原Anti-CD276 AntibodyRET原癌基因(RET)
釀酒酵母多配體蛋白聚糖1抗原Anti-CD3 zeta AntibodyREST輔抑制因子3(RCOR3)
中國蜜環菌黑色瘤粘附分子CD146抗原Anti-CD300C AntibodyREST輔抑制因子2(RCOR2)
血耳*肽N抗原Anti-CD302 AntibodyREST輔抑制因子1(RCOR1)
釀酒酵母CD14/內受體抗原Anti-CD300E AntibodyReprimo蛋白(RPRM)
果生鏈核盤菌CD28抗原Anti-CD300LG AntibodyRepetin蛋白(RPTN)
ATCC 12980活化白粘附分子抗原Anti-CD300LF AntibodyRecepin蛋白(CIR)
泛激3抗體SphingomonasyunnanensisKM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株
蛋白激活受體4抗體Massiliaaerilata人視網膜母細胞瘤
早老γ分泌2抗體多黏類芽孢桿菌人肺癌細胞(淋巴結轉移)
絲/蘇蛋白激PIM3抗體紡綞形賴芽孢桿菌豬小腸上皮細胞
泛JAK抑制劑(Pyridone 6)*簡單類諾氏 (+)-Puerol B 2"-O-glucoside
大腸埃希 Clausine Z
土壤伊薩酵母 (E)-2-[3,4-雙(乙酰氧基)苯基]乙基 3-O-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-BETA-
盤長孢狀盤孢 Yuehgesin C
鐮刀 黃腐 D
燕麥嗜酸西瓜亞種* 中國臺灣三尖杉堿
總狀共頭霉(可訂購) Wilforol C
梅林青霉 葡萄 D
紫色紅曲 喜果苷
細孢毛霉 Uvedalin
葉生布勒擔子酵母 鉤藤甙元 C
金針菇雜19 Tupichilignan A
日本曲霉 雷藤二萜醌 B
無乳鏈球 Triptocallic acid D
Burkholderia stabilis Vandamme et al. Triptocallic acid A