詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
WAY-262611 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
WAY-262611是無翼的β-聯蛋白激動劑,可增加骨形成速率,在TCF-熒光素酶測定實驗中的EC50值為0.63μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1123231-07-1 純度:99.08% 分子量:318.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
貝萊斯芽胞桿菌嗜中性粒抗原CD177抗原Anti-CD300LB AntibodyRasGTP激活蛋白1(RASA1)
根瘤菌CD24抗原Anti-CD300LD AntibodyRAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)
蘇云金芽孢桿菌白分化抗原CD2APAnti-CD32(FCGR2C) AntibodyRAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)
桂花耳*CD33抗原(大、小鼠)Anti-CD37 AntibodyRAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)
秦氏蜜環菌CD34抗原(表面的唾液粘蛋白)Anti-CD3EAP AntibodyRAR相關孤兒受體γ(RORγ)
芽孢桿菌CD38多肽(小鼠、大鼠)Anti-CD53 AntibodyRap鳥核苷交換因子1(RAPGEF1)
嗜中溫寒冷桿菌CD38抗原(人)Anti-CD81 AntibodyRalA結合蛋白1(RALBP1)
解淀粉芽孢桿菌CD36(多肽)Anti-CD84 AntibodyRaftlin2蛋白(RFTN2)
阿姆斯特丹曲霉CD7抗原Anti-CD98 AntibodyRAD54樣蛋白2(RAD54L2)
解角質微桿菌CD40L抗原Anti-CD93 AntibodyRAD51同源物(RAD51)
大腸桿菌CD44抗原 (多肽抗原)Anti-CD97 AntibodyRAD23同源物B(RAD23B)
斐濟球腔菌抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Anti-CD70 AntibodyRAD1同源物(RAD1)
淡紫擬青霉醋促生長激釋放肽2Anti-CD99 AntibodyRac-GTP激活蛋白1(RACGAP1)
假單胞菌屬醋促生長激釋放肽6Anti-CDC14A AntibodyRab親和蛋白3A(RPH3A)
嗜麥芽寡單胞菌五勝肽/容肽—M肽Anti-CDC16 AntibodyRabconnectin3蛋白(RC3)
聚生殼菌醋諾坦IIAnti-CDC23 AntibodyRAB11家族相互作用蛋白3(RAB11FIP3)
組蛋白精甲基轉移5抗體耐硼賴芽孢桿菌大鼠腎足細胞
腫瘤錯配修復基因PMS1抗體少動鞘單胞菌人T淋巴細胞系
原鈣粘蛋白γA7抗體Acidovoraxsp.人骨髓瘤細胞
原鈣粘蛋白γA8抗體不動桿菌屬人胰腺癌細胞
β-聯蛋白激動劑(WAY-262611)葡萄座腔 Tilifodiolide
果生假絲酵母 云南紅豆杉酯甲
Microbacterium halotolerans Tatarinoid A
鮭色鎖擲酵母 Stephavanine
褐孢大禿馬勃 Splendoside
少根根霉原變種 Shizukanolide F
灰草黃鏈霉 Serpentinic acid
多粘類芽孢桿 半翅鹽膚木內酯
枯草芽孢桿 Secaubryenol
透明俊片 Scutebata F
香菇 Scutebata E
根瘤 Scutebata C
云芝栓孔(變色栓) Scutebarbatine X
平臍蠕孢 Scutebarbatine B
運動節桿 黃花香茶菜甲,黃花甲,大萼變型甲