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如何避免在凝膠制備過程中產生氣泡?
試劑添加與混合
緩慢傾倒:在配制凝膠溶液時,將試劑緩慢倒入容器中,避免快速傾倒產生沖擊力,從而減少氣泡的形成。例如,將丙烯酰胺溶液倒入緩沖液中時,可沿容器壁緩緩倒入。
輕柔攪拌:使用磁力攪拌器或玻璃棒攪拌溶液時,速度不宜過快,以免將空氣卷入溶液中。攪拌時間也應適當,確保試劑充分混合即可,過度攪拌易產生氣泡。若使用玻璃棒,攪拌過程中應避免玻璃棒與容器壁或底部劇烈摩擦。
靜置脫氣:配制好的凝膠溶液可先靜置一段時間,讓溶液中可能存在的微小氣泡自然上浮到表面并破裂。對于一些對氣泡要求較高的實驗,可將溶液置于真空干燥器中進行脫氣處理,去除溶液中的溶解氧和微小氣泡。
凝膠灌注
避免溶液晃動:將凝膠溶液灌注到電泳槽或模具中時,應保持平穩操作,避免溶液晃動產生氣泡。可使用移液器或注射器緩慢地將溶液注入,盡量減少溶液與空氣的接觸面積。
排除模具中的空氣:在灌注凝膠之前,要確保電泳槽或模具干凈且干燥。對于有密封墊或梳子的模具,要檢查其密封性,防止空氣進入。在插入梳子時,要緩慢且垂直插入,避免帶入空氣。若梳子插入后發現有氣泡,應輕輕拔出梳子,排出氣泡后再重新插入。
環境因素控制
控制溫度:凝膠制備過程中的溫度變化可能會導致溶液中氣體的溶解度發生改變,從而產生氣泡。因此,要盡量保持環境溫度穩定,避免在溫度變化較大的場所進行凝膠制備。例如,從冰箱中取出的試劑應在室溫下放置一段時間,使其溫度與環境溫度一致后再使用。
降低環境濕度:高濕度環境可能會使溶液表面吸收空氣中的水分,影響溶液的性質,增加氣泡產生的可能性。保持實驗環境干燥,可使用除濕設備降低濕度,有助于減少氣泡的產生。
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