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重組胰蛋白酶研究背景
胰蛋白酶是一種可以特異性水解肽鏈中的賴氨酸和精氨酸C‐端肽鍵的絲氨酸蛋白酶。在生物制品生產過程中作為一種重要的生物源性材料，廣泛應用于病毒性疫苗、生物技術產品以及其他醫療產品的生產制造，例如，流感病毒疫苗中病毒顆粒的激活、疫苗生產中動物細胞的傳代培養、胰島素單鏈前體轉化為雙鏈胰島素等。目前國內的疫苗及胰島素生產企業仍然是以動物源性胰蛋白酶（從豬或牛胰腺中分離純化獲得）為主，但會存在生產工藝復雜、潛在的人畜共患性病原污染的風險。近年來，由于生產過程中使用動物源性胰蛋白酶導致生物制品被外源因子污染案例時有發生，引起了人們對生物制品使用胰蛋白酶安全性的廣泛關注。隨著疫苗產業的不斷發展，胰蛋白酶的市場需求量也穩步上升。此外，生物制品生產所需原輔料的安全性越來越受到重視和關注，無動物源性原輔料替代動物源性原輔料已成為必然趨勢。利用基因工程菌表達的重組胰蛋白酶因其純度高，安全性好，理化性質穩定等優點受到越來越多的青睞。
重組胰蛋白酶來源和形式
重組胰蛋白酶是利用DNA重組技術在大腸桿菌中表達的重組豬胰蛋白酶，其氨基酸序列與豬胰蛋白酶一致，是由223個氨基酸構成，含有6對二硫鍵。包含兩種胰蛋白酶活性形式：α‐胰蛋白酶（相對分子質量23481）和β‐胰蛋白酶（相對分子質量23463）。具有活性的重組胰蛋白酶的空間構象表面暴露出精氨酸和賴氨酸，因此容易發生自水解，使得單鏈β‐胰蛋白酶通過自水解的形成雙鏈α‐胰蛋白酶，α‐胰蛋白酶通過其內部二硫鍵維持結構，但其活性及穩定性均低于β‐胰蛋白酶。可替代傳統提取胰酶用于疫苗、干細胞、免疫細胞治療、藥物篩選、抗體等領域細胞消化過程。
逐典重組胰蛋白酶是一款滿足藥典要求的GMP級非動物源胰蛋白酶
Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產設計，具有高效、非動物源和高質量標準的特點。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌(E.col) 重組表達生產。在GMP級別環境中生產的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細胞且不造成傷害，產品質量滿足藥典要求。
逐典重組胰蛋白酶特點
1.GMP級生產環境、符合藥典標準
2.重組生產、不含雜酶
3.批量生產、質量穩定
4.高純度、高比活
5.非動物源原料
逐典重組胰蛋白酶應用場景
組織塊的消化解離和原代細胞的獲取、貼壁細胞的傳代消化和收獲、微載體方法培養的細胞消化和收獲。
實驗數據
CT26.WT 和 HEK293FT 細胞消化實驗
CT26WT和HEK293FT在經Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好，細胞活率顯示對細胞傷害較小，不會影響細胞傳代。
Trypelectase重組豬胰酶對細胞消化過程及傳代24h細胞貼壁圖
