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應用分享|GMP級別TryPLUS消化液助力病毒生產工藝開發!

2024-1-26  閱讀(185)

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基因治療,也稱為細胞和基因治療(Cell and GeneTherapy),是一種利用基因治療載體將外源治療性基因轉導至細胞,再通過外源基因的轉錄和翻譯,改變細胞原有基因表達從而達到治療疾病的目的。目前,國內基于基因治療的生產工藝主要涉及兩個方向,第一類即基于溶瘤病毒進行相關藥物開發,第二類即基于質粒/病毒載體介導的基因療法。

溶瘤病毒不僅可以發揮直接由病毒介導的腫瘤細胞殺傷功能,也能通過破壞腫瘤血管系統從而達到間接殺傷腫瘤的目的。對于基因治療中的腺病毒AAV載體,其能夠長期存在于未分裂、最終分化的細胞群中而不被細胞當做外源DNA降解,從而達到藥物遞送的作用。慢病毒LV載體則可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。

目前已上市的藥物中以AAV作為載體的代表性藥物例如諾華治療脊髓性肌癥(SMA)的Zolgensma,上市以來也取得了顯著反向,商業化較為成功。接下來就讓我們來看一下不同病毒的生產工藝吧!





01

溶瘤病毒生產工藝

病毒工藝開流程




02

質粒/病毒載體生產工藝

一 慢病毒質粒構建流程



二 腺病毒質粒構建流程




三 腺相關病毒質粒構建




在上游細胞培養過程中,培養工藝不同會導致病毒產量或質量的不同,目前對于細胞培養的工藝主要分為貼壁工藝及懸浮工藝。貼壁工藝是目前市場上主流的生產工藝,主要有細胞工廠、固定床、微載體工藝等。而懸浮工藝主要受限于細胞系和培養基,但易于放大,是較為理想的工業化生產模式。



胰酶作為細胞貼壁工藝中的關鍵物料之一,酶活性、有無動物源等因素均至關重要。逐典TryPLUS消化液作為體外重組表達的胰酶類似物,與傳統胰酶的消化動力學相似,但區別與傳統胰酶,具有純度高,細胞毒性低,細胞消化溫和等特點,產品無動物源性,無需胰酶抑制劑,稀釋即可進行終止,并且能夠兼容多種細胞培養體系,定能成為您細胞培養工藝中的佳幫手!

03

逐典TryPLUS消化液產品亮點

  • DMF備案

  • 非動物來源

  • 室溫貯存,無需胰酶抑制劑,稀釋即可終止

  • 提高表達量、降低分離純化難度

  • 消化溫和,消化后細胞活性高

  • 即開即用,方便快捷




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