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一，藥物研發(fā)關(guān)鍵點(diǎn)
二，理想的藥物靶標(biāo)篩選模型
1）高靈敏度
2）寬的線性范圍
3）穩(wěn)定且可重復(fù)
4）操作簡單
5）可進(jìn)行高通量篩選
三，高靈敏度發(fā)光檢測技術(shù)：螢光素酶檢測技術(shù)
熒光與化學(xué)發(fā)光的比較
由于熒光需要光激發(fā)后才能發(fā)出光，因此必須有一種方法可以區(qū)分輸入光和輸出光，需要濾光片將某些波長的光過濾掉，只讓發(fā)射光的波長通過。然而，沒有任何濾光片是的，總有一定量的激發(fā)光會(huì)透過濾光片，因此就增加了背景噪聲。
生物化學(xué)發(fā)光過程不需要外部光源，均從發(fā)光過程中產(chǎn)生。這意味著沒有背景光。因此，產(chǎn)生的光與測得的光之間存在很強(qiáng)的線性相關(guān)性，其線性范圍遠(yuǎn)大于熒光：發(fā)光過程為7~8個(gè)數(shù)量級(jí)，而熒光過程僅為3~4個(gè)數(shù)量級(jí)。
螢光素酶：是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱。
1. 具有酶活性(信號(hào)放大能力)
2. 蛋白小
3. 沒有內(nèi)源性表達(dá)，背景低
4. 易于定量
5. 高靈敏度、線性范圍寬
6. 反應(yīng)迅速
7. 可實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測
四，螢光素酶技術(shù)應(yīng)用于藥物靶標(biāo)篩選
基于螢光素酶的應(yīng)用，開發(fā)藥物靶標(biāo)篩選產(chǎn)品：
1）檢測螢光素酶水平的變化；
2）檢測ATP，例如：
• RealTime-GloTM Extracellular ATP 檢測
• GTPase-GloTM檢測
• ENLITEN® ATP 檢測
• 激酶活性檢測
• 細(xì)胞/細(xì)菌活力檢測
• cAMP
• Pgp糖蛋白檢測
3）檢測修飾的螢光素底物，例如：
• Caspase 3/7活性檢測
逐典螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒
逐典螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒旨在準(zhǔn)確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性，應(yīng)用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動(dòng)子功能測定、信號(hào)通路等研究。
目前，最常使用的螢光素酶主要包括 Firefly luciferase 和 Renilla luciferase，針對(duì)報(bào)告基因檢測不同的側(cè)重需求，逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。
