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細胞治療工藝流程優化案例

IsoPlexis 單細胞功能蛋白質組技術將單細胞技術和功能性蛋白質組學結合起來采用的微流控微室反應和抗體條碼技術在單細胞水平對分泌的多種細胞因子和胞內磷酸化蛋白組等在活細胞狀態下進行高靈敏多重檢測分析，對功能蛋白進行定性、定量，以此洞察單細胞功能異質性。

通過簡單易用的生信分析軟件對單細胞數據進行自動分析，得到具有指導性的結果，幫助下一步決策。

IsoPlexis助力Iovance TIL 工藝優化

發表成果：Iovance Generation-2 Tumor-infiltrating lymphocyte product is reinvigorated during the manufacturing process, ESMO virtual conference, 2020

研究目的：過繼細胞療法是一種可以逆轉內源性 TIL 功能障礙的治療策略，其過程涉及將 T 細胞從免疫抑制性 TME 中遷移出來， 在體外顯著擴增 TIL，同時使其恢復活力，并將細胞重新注入患者體內。為了確定使用 Iovance 的第 2 代擴增方案 （D22 TIL） 生成的 TIL 是否導致 TIL 群體重新煥活，相對于內源性 TIL （D0），評估了 D0 和 D22 TIL 的表型、功能和腫瘤反應性。

實驗設計：使用 FACS 對從消化的腫瘤活檢中分離的內源性 CD3+ TIL （D0） 進行分選，并與使用 Iovance 的 Gen 2 工藝 （D22） 擴增 22 天的 TIL 進行比較。來自黑色素瘤、宮頸癌和頭頸部鱗狀細胞癌的 7 對 D0 和 D22 TIL 的 T 細胞亞群通過 FACS 評估表型和調節標志物，通過體外激活評估功能，通過自體腫瘤共培養評估腫瘤反應性。

實驗結果：在經過IOVANCE第二代TIL擴增培養22天后，TIL中CD4和CD8的多功能性和PSI指數顯著升高。說明Iovance 的第二 代（Gen2）TIL 擴增方案從多功能細胞角度能夠與T細胞有效激活。結論：IsoCode單細胞分泌蛋白組芯片提供對于TIL細胞治療產品工藝變更后的有效評估。

評估生產中攪拌式培養對于T細胞功能影響

發表文章：Enabling Allogeneic T Cell-Based Therapies: Scalable Stirred-Tank Bioreactor Mediated Manufacturing, Front. Med. Technol. ( 2020, IF=9.927)

研究目的：細胞療法的臨床需求要求 T 細胞活化和擴增技術具備有效性和可放大性。然而，新技術的聯合使用可能會對治療效 果產生意想不到的影響。

實驗設計：在這項研究中Lonza 通過比較攪拌式培養前后的細胞，研究了攪拌式生物反應器對細胞多功能性的影響。

實驗結果：結果顯示，經攪拌式培養 14 天后，同時分泌 7 種或更多細胞因子的 CD4 和 CD8 細胞顯著增加，其中許多細胞分 泌了效應、刺激性、趨化、調節性和炎癥等功能的細胞因子組合。

結論：在決定是否采用新的制造和生物工藝技術時，這些詳細的功能信息可以幫助驗證細胞功能。