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類器官小課堂第二彈 | 腫瘤類器官模型如何構建?關鍵細胞因子全解析!

2025-5-28  閱讀(51)

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近年來,類器官技術為腫瘤研究提供了革命性工具,尤其是腫瘤類器官模型,能夠高度模擬患者腫瘤微環(huán)境,成為藥物篩選、機制研究和個性化醫(yī)療的“明星模型"。

然而,如何成功構建腫瘤類器官?哪些細胞因子是核心?濃度如何把控?本文將為你一一揭曉!

腫瘤類器官構建流程速覽

樣本獲取:手術或活檢獲取腫瘤組織,需確保樣本活性(24小時內處理最佳)。

組織處理:機械/酶解法解離為單細胞或微小組織塊。

基質膠包埋:常用Matrigel或膠原凝膠,模擬細胞外基質(ECM)。

培養(yǎng)基配制:基礎培養(yǎng)基(如DMEM/F12)添加關鍵生長因子、激素及小分子。

培養(yǎng)與傳代:3D培養(yǎng)7-14天,定期觀察形態(tài)并優(yōu)化條件。

常見腫瘤類器官模型及核心細胞因子

不同腫瘤類型需定制化培養(yǎng)方案,以下為5大常見模型的關鍵參數(shù):

01結直腸癌類器官

核心因子:EGF(50 ng/ml)、Wnt3a(100 ng/ml)、Noggin(100 ng/ml)、R-spondin 1(500 ng/ml)。

特殊添加:TGF-β抑制劑(10 μM)或p38抑制劑(1 μM),防止正常細胞過度生長。

02乳腺癌類器官

核心因子:EGF(20 ng/ml)、FGF10(100 ng/ml)、Heregulin(10 ng/ml)。

激素支持:氫化可的松(0.5 μg/ml)、胰島素(5 μg/ml)。

03肺癌類器官

核心因子:FGF7(10 ng/ml)、FGF10(50 ng/ml)、HGF(50 ng/ml)。

關鍵通路支持:Wnt信號激活劑(3 μM)。

04肝癌類器官

核心因子:HGF(40 ng/ml)、EGF(20 ng/ml)、FGF19(100 ng/ml)。

基質支持:高濃度Matrigel(>70%)提升結構穩(wěn)定性。

05胰腺癌類器官

核心因子:EGF(50 ng/ml)、FGF10(100 ng/ml)、Noggin(150 ng/ml)。

特殊需求:需添加Rho激酶抑制劑(10 μM)減少細胞凋亡。

細胞因子的“角色"解析

EGF:促進上皮細胞增殖,濃度通常20-100 ng/ml,過量可能誘導分化。

Wnt3a/R-spondin:維持干細胞自我更新,結直腸癌模型中濃度較高。

Noggin:抑制BMP通路,防止間質細胞污染(濃度50-200 ng/ml)。

HGF/FGF家族:驅動細胞遷移和血管生成,在轉移性腫瘤模型中尤為關鍵。

避坑指南:構建失敗的常見原因

?樣本活性不足:運輸時間過長或消化過度導致細胞死亡。

?細胞因子濃度失衡:過高引發(fā)異常分化,過低則無法支持生長。

?污染風險:嚴格無菌操作,添加雙抗(青霉素-鏈霉素)。

?個體化差異:患者來源樣本需優(yōu)化條件,避免“一刀切"。

應用場景:從實驗室到臨床

?藥物敏感性檢測:7天內評估化療/靶向藥療效,指導臨床用藥。

?基因編輯研究:CRISPR技術結合類器官,驗證驅動基因功能。

?免疫治療平臺:共培養(yǎng)T細胞與類器官,篩選免疫檢查點抑制劑。

逐典生物提供一系列類器官相關的高質量細胞因子,包括Wnt-3a, R-Spondin 1、EGF, Noggin, FGF-7和FGF-10等因子,適用于類器官相關培養(yǎng)。

逐典類器官細胞因子特點



數(shù)據展示








重組人催乳素可刺激 Nb2-11 大鼠淋巴瘤細胞的增殖。


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