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PCY功能性篩選前沿—進軍自免

2025-6-4  閱讀(30)

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在前期的推送中,我們分享了高內涵技術主導的Pharmacoscopy(PCY)Ex vivo篩選技術平臺在血液瘤精準醫療的成功,和實體瘤、細胞治療等重要領域的應用前沿。不出意外,開辟腫瘤之外的新戰場成了PCY技術的重要突破點。在此,我們分享PCY技術以類風濕性關節炎(RA)為切入點,在自免領域功能性精準醫療的創新研究。相關的研究成果發表于柳葉刀旗下的eBioMedicine上。有意思的是,PCY技術在血液瘤的突破案例同樣也發表于柳葉刀旗下的lancet haematology。



與直觀的差異化腫瘤殺傷表型不同(下面第一個流程),RA的自免相關細胞表型會更為復雜。對此,研究進一步發揮細胞影像的內涵優勢,靶向RA發病相關、臨床易獲得的PBMC細胞群體,結合臨床RA藥物和陽性對照化合物,構建PCY功能性篩選流程(下面第二個流程)。



在直接分析各種免疫細胞群體豐度(下圖左)的基礎上,研究進一步開發高內涵技術平臺,量化細胞的形態(下圖中)和相互作用表型(下圖右)。



在上述的PCY技術路線上,我們就可以直觀地檢測ex vivo藥物刺激對于PBMC不同細胞群體的表型影響(下圖左),并進一步分析量化形態學(如下圖中)和重要的細胞間相互作用表型(下圖右)的變化。同時,研究也證明該技術路線還可支持活細胞體系,拓展了PCY技術的應用場景。



在此基礎上,研究在ex vivo水平篩選和分析RA藥物和免疫細胞表型的相關性。開展聚類研究的同時,研究挖掘和發現新的藥物作用表型,如Etanercept對Monocyte的表型影響。與健康對照組相比,研究也進一步探究RA患者體內藥物治療(In vivo treatment)對PBMCs復雜表型的影響。

最后,回歸到自免精準醫療的主題,研究利用PCY技術來區分健康對照組和不同發病程度的類風濕關節炎(RA)患者(下圖左)和潛在生物標志物挖掘。有意思的是,PBMC群體中,T細胞對陽性刺激藥物,而不是RA藥物處理的形態學反應,有能效指示疾病的發生和程度(下圖中、右)。這一發現很可能是自免情況下,持續的差異化細胞激活所致。



與之前的PCY篩選研究一致,Opera Phenix高內涵平臺結合CellCarrier成像微孔板依然主導核心的PCY篩選流程。此外,JANUS移液工作站則參與了自動化免疫熒光染色工作。通過優化液體處理參數,JANUS液體處理工作站可用于復雜細胞模型細胞影像篩選中,如模型培養、藥物處理和染色等多個流程的自動化工作(如下流程圖)。自動化移液技術的引入可顯著提高細胞影像篩選的可重復性和規模化能力,同時減少了人為操作導致的誤差和對珍貴細胞模型的破壞風險。



JANUS移液工作站



Opera Phenix™ PLUS高內涵篩選系統


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