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上海牧榮生物科技有限公司

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genovis產品介紹—IgA1 特異性蛋白酶

閱讀:1097      發布時間:2024-1-26
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IgASAP Sub1 是一種 IgA1 特異性蛋白酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人類 IgA1,產生完整且同質的 Fab 和 Fc 片段。

該酶能夠生成完整的單價 Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析,從而有助于在疫苗、治療和診斷等開發過程中進行 IgA1 表征。

  • 實現IgA1 的中層表征質量控制

  • 快速– 在 1 小時內生成均質的 Fab 和 Fc 片段

  • 高度特異性– 人類 IgA1 鉸鏈上方有一個消化位點

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人類 IgA1 的位點特異性消化

為了證明 IgASAP Sub1 的位點特異性,將市售的人骨髓瘤 IgA1 用凍干的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小時,并與未消化的 IgA1 進行比較。由于 IgA1 攜帶多個 N- 和 O- 聚糖,因此使用 OmniGLYZOR 試劑盒處理樣品,包括在變性條件下使用 PNGaseF 凍干進行額外的去糖基化步驟,以去除所有 N-聚糖,以方便數據解釋。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、簡單,并且在生理條件下進行,酶的特異性可防止 IgA1 的過度消化。盡管起始材料不同,但數據清楚地顯示了人 IgA1 上鉸鏈區 (VPSTPP / TPSPST) 的單個消化位點,并強調了使用中級工作流程為此類復雜樣品生成高分辨率質量數據的優勢。


圖 1. IgA1 的位點特異性消化。 a)工作流程示意圖。來自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重鏈 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷積質譜使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小時后的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的異質性源自多個 C 末端截斷和剩余的延伸 O-聚糖,未被 OmniGLYZOR 去除。通過反相色譜(ACQUITY Premier Protein BEH C4,300 ?,1.7 µm 2.1 x 100 mm,Waters™)分離樣品,并使用 ESI-QTOF MS(Bruker Impact II)進行分析。

IgASAP Sub1 凍干   貨號:I0-IA1-010

用于 IgA1 以上鉸鏈消化的凍干酶。

IgASAP Sub1 凍干劑以凍干粉末形式提供,裝在 1000 單位小瓶中,用于消化 1 mg IgA1。

  • 方法開發的靈活格式

  • 可以組合酶以提高效率

  • 適合自動化工作流程

  • 即可使用——只需加水即可!




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